《人工国槐林春季大型土壤动物群落结构对人为管理方式的响应 Responses of Soil Macro-fauna Community to Artificial Managements in Sophora japonica Linn.Plantation》.pdfVIP

中国农学通报 2013,29(10):11-17 Chinese Agricultural Science Bulletin 红花檵木实时荧光定量PCR 分析内参基因的选择 张 力，于晓英，符红艳，陈己任，李 达，陈海霞 （湖南农业大学园艺园林学院，长沙 410128） 摘 要：实时荧光定量PCR(qRT-PCR)是目前基因定量表达分析的重要方法，而适宜内参基因的选择对 目的基因表达特征的准确分析至关重要，研究目的是筛选适宜于红花檵木目的基因qRT-PCR 分析的校 正内参基因。以红花檵木‘大叶红’(Lorpetalum chinense var. rubrum ‘Dayehong ’) 的芽、嫩茎、叶、花瓣、 种子和愈伤组织为材料，采用qRT-PCR 技术比较了4 个常用看家基因微管蛋白基因(α-tubulin) 、肌动蛋 白基因(β-actin) 、18S 核糖体RNA(18S rRNA)与甘油醛-3-磷酸-脱氢酶基因(GAPDH) 的表达情况。4 个 看家基因均能特异扩增并显示较高的扩增效率；经geNorm 和NormFinder 程序综合分析，当采用 qRT-PCR 分析红花檵木不同器官和组织中的基因表达差异时，以GAPDH 表达最为稳定；在比较不同发 育阶段的叶片及明暗处理的愈伤组织中的基因表达差异时， β-actin表达最为稳定。当采用qRT-PCR 分 析红花檵木不同器官和组织及不同发育阶段的叶片与明暗处理的愈伤组织基因表达差异时，可以分别 选择GAPDH 和β-actin作为校正内参基因。 关键词：红花檵木；实时荧光定量PCR；内参基因；选择 中图分类号：S687.2 文献标志码：A 论文编号：2012-3872 Reference Genes Selection for Real-time Fluorescence Quantitative PCR in Lorpetalum chinense var. rubrum ZhangLi,YuXiaoying,FuHongyan,ChenJiren,LiDa,Chenhaixia (College of Horticulture and Landscape, Hunan Agriculture University,Changsha410128) Abstract: Real-timefluorescencequantitativePCR(qRT-PCR)hasbeenwidelyusedingeneexpression analysistodate,andselectionofsuitablereferencegenesforqRT-PCRaccordingtospecificexperimental materialsorconditionsisveryimportantforaccuratenormalizationoftargetgeneexpression.Thegoalofthis studywastoselectionthesuitablereferencegenesforqRT-PCRin L.chinense var. rubrum.Inthisstudy, expressionoffourcommonlyusedhousekeepinggenessuchas α-tubulin, β-actin, 18SribsomalRNA(18S rRNA)andglyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase(GAPDH)wereassessedbyqRT-PCRinvarious tissues(buds,youngstems,leaves,petals,seedsandcallus).Allthecandidatereferencegenescouldamplify specificallywithhigheff