原位杂交技术在大白菜和结球甘蓝上的应用的研究.pdf

摘要 oleracea 大白菜(grass如a 5印，pB渤％缸)和结球甘蓝(Brassicavarcapi触 camp∞a4sL 工)是芸薹属作物中广泛种植的蔬菜，同时也是我国重要的农业资源。本研究以二倍 rDNA在大白菜和结球甘蓝的分布特点，准确识别了A、c基因组 分析重复序列25S 的染色体。并分别以大白菜基因组总DNA和结球甘蓝基因组总DNA为探针，对二倍体 大白菜、二倍体结球甘蓝和异源三倍体进行基因组原位杂交(GISH)，分析杂交信号 特点，探讨A基因组和C基因组的亲缘关系。研究结果如下： rDNA杂交信号，它们分别位于 1．25SrDNA在大白菜基因组中存在着10个25S 1号长臂近中部， 2号、3号和4号长臂靠近着丝点的位置，lO号染色体的随体上， 杂交信号在不同染色体上的荧光强度强弱不同。 2．25S rDNA在结球甘蓝染色体上捡出了4个杂交信号，它们分别位于3号染色 上也都检出了4个信号，信号所属的染色体和在染色体上分布的位置与二倍体相同。 3．25S rDNA在异源三倍体间期核上检出了9个杂交信号，中期染色体上检出了8 个杂交信号。根据信号的位置可知，它们分别位于结球甘蓝的3号染色体短臂的末端 和9号染色体的随体上，以及大白菜的2号、3号和4号染色体的长臂靠近着丝点的 位置和10号染色体的随体上，不同染色体上的杂交信号强弱不同。 4．分别以大白菜的基因组总DNA和结球甘蓝的基因组总DNA为探针与大白菜 和结球甘蓝杂交，所有染色体上均有杂交信号，但是A、C基因组染色体间的杂交信 号特征不同。 5．大白菜的基因组总DNA为探针在异源三倍体杂种染色体上杂交。无封阻时， 28条染色体上都有清晰而强烈的杂交信号，但A，C基因组染色体间的杂交信号的特 征不同：封阻适当时，有18条染色体上的信号十分微弱，其余lO条染色体上的信号 明显可见，能在一定程度上区分大白菜与结球甘蓝的染色体；封阻过度时，所有的染 色体杂交信号都十分微弱，难以区分。 6．结球甘蓝的基因组总DNA为探针在异源三倍体杂种染色体上杂交。无封阻 时，所有染色体上都有清晰而强烈的杂交信号，但A、c基因组染色体上的杂交信号 能明确区分：封阻适当时，有18条染色体上有强烈的杂交信号，其余10条染色体上 的信号十分微弱，在一定程度上能区分大白菜和结球甘蓝的染色体；过度封阻时，所 有的杂交信号都十分微弱，难以区分。 rDNA；荧光原位杂交；基因组 关键词：大白菜；结球甘蓝；异源三倍体杂种；25S 原位杂交 Studiesofinsitu inChinese Application HybridizationTechnique L oleracea L) campestrlsssp．pekinensls)andCabbage(Brassicavar．eapitata Author：．Qieuj啪 Major：． Olericultum Tutor． Shen shuxiag ofHoaiculture,AgriculturalUniversityofHebei，Baoding (College 071001，Chin) Abstract Chinese SSn