凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei复合保鲜剂的研制及抑菌机理初步的研究.pdfVIP

凡纳滨对虾但itopenaeusvannamei)复合保鲜剂的研制及其抑 菌机理初步研究 摘要 本文研究了茶多酚、壳聚糖、植酸、乳酸链球菌素、鱼腥草黄芩及蒲公英提 取物对凡纳滨对虾主要优势腐败菌(SSO)的抑菌效果及其抑菌机制。在单一抑 菌剂筛选基础上，采用体外抑菌试验，进行了复合保鲜剂最佳配比的优化，并研 究了复合保鲜剂的抑菌机理及对凡纳滨对虾的冷藏保鲜效果。本研究根据凡纳滨 对虾自身的贮藏特性，使其抑菌和保鲜更有针对性，大大提高了对虾冷藏保鲜的 品质，改善了以往复合保鲜剂虽然抑菌谱广，但是保鲜效果不佳的缺点。 本论文的研究内容主要包括以下几个方面： 1．单一抑菌剂的筛选 以凡纳滨对虾的优势腐败菌希瓦氏菌、不动杆菌、荧光假单胞菌作为供试菌， 采用酶标仪与涂布培养的方法，检测茶多酚、壳聚糖、植酸、乳酸链球菌素、鱼 腥草、黄芩及蒲公英提取物(Tk提物)对供试菌的抑菌效果。结果表明，茶多酚、 植酸和蒲公英提取物对三种菌的抑菌作用较强，培养lOh后，O。10％的茶多酚对 希瓦氏菌、不动杆菌和荧光假单胞菌的抑制率分别为92．56％、90．48％和90．90％； 英提取物(以总黄酮计，为O．61％)对这三种菌的抑制率分别为99．13％、94．29％ 和5．41％。茶多酚、植酸和蒲公英提取物(以总黄酮计)能够杀死所有细菌的最 低浓度，分别为O．10％、O．10％、1．25％(O．15％)。根据最低杀菌浓度以及参考用 量，最后确定选用茶多酚、植酸和蒲公英提取物(以总黄酮计)的浓度范围分别 为：0．020／o0．08％、0．04％-,0．08％、0．4％1．0％(0．05％-0．12％)。 2．复合保鲜剂的配比优化 在单一抑菌剂实验的基础上，通过3因素3水平L9(33)正交试验，将茶多酚、 植酸和蒲公英提取物进行复配，以三种腐败菌的培养液在600nm处的吸光值为 评价指标，从中筛选出抑菌效果最佳的复合保鲜剂配比。根据正交试验结果和凡 纳滨对虾中的主要优势腐败菌，最后确定复合保鲜剂的最佳配比为：茶多酚 0．05％、植酸0．06％、蒲公英提取物1．00％(其中总黄酮含量为O．12％)，抑菌剂 的总浓度为1．11％。用1．11％的复合保鲜剂处理凡纳滨对虾，浸泡沥干后放入保 鲜袋，置于冷藏条件4。C下贮藏。到达二级鲜度及腐败初期时，保鲜剂处理组的 volatilebase pH值、挥发性盐基氮(total nitrogen，TVB．N值)、细菌总数均比对 照显著降低(P0．05)。感官评价得分高于对照组，保藏期比对照延长了2．3d。 3．复合保鲜剂的抑菌机理研究 以凡纳滨对虾的主要优势腐败菌希瓦氏菌、不动杆菌和荧光假单胞菌为研究 对象，研究复合保鲜剂的抑菌机理。利用打孔法确定最小抑菌浓度，利用抑菌动 力学、细菌生长曲线、细胞膜通透性、碱性磷酸酶(AKP酶)活性和扫描电镜 观察细菌超微结构来评价复合保鲜剂的抑菌机理。结果表明，复合保鲜剂对希瓦 氏菌、不动杆菌、荧光假单胞菌的最小抑茵浓度(MIC)分别为0．13％、0．13％、 0．26％。经复合保鲜剂处理后，菌体细胞变小，细胞质从菌体中泄露，细菌培养 液的电导率值增加，AKP酶活性升高。经复合保鲜剂处理后，希瓦氏茵、不动 杆菌和荧光假单胞菌的生长曲线均受到了明显抑制(火O．05)，未出现对数生长 期；抑菌活力分别在7h、6h和9h达到最大值，均达到O．8以上；电导率值和 AKP酶的活性均明显增大(氏0．05)。表明保鲜剂处理使细菌细胞的内环境和细 胞膜通透性受到破坏，抑制了菌体正常的生长和代谢，从而起到抑菌和杀菌作用。 关键词：凡纳滨对虾，复合保鲜剂，优势腐败菌，抑菌机理 reI i mi na anti bacteri aI Researchon rati onand prepa p ry of i veofL mechani sms compoundpreservatitopenaeus Abstract theantibacterialeffect