草鱼线粒体型超氧化物歧化酶的生化遗传特性研究.pdfVIP

摘 要 超氧化物歧化酶(SOD)是一种对生物细胞保护至关重要，在进 化上比较保守的酶。因此，超氧化物歧化酶作为分子钟或分子标记 已被广泛应用于生物进化研究、群体遗传结构分析以及品系鉴定。 但目前人们对鱼类超氧化物歧化酶的生物化学和遗传学特性都尚未 进行过系统和深入的研究。为使这一重要的分子标记能更好地应用 于鱼类遗传育种、种质资源保护以及进化研究，本实验采用聚丙烯 酰胺梯度凝胶垂直电泳法，研究了草鱼线粒体型超氧化物歧化酶 (fm—SOD)的同功酶形式、生化遗传表型、在不同组织中的分布、 亚基组成以及金属类型。所得实验结果如下： (】)草鱼线粒体型超氧化物歧化酶有三种不同的同功酶形式； 按其在酶谱上迁移率的不同，从正极到负极分别命名为fm-SODl， fm-SOD 3，其中fm—SOD 3迁 2，fm—SOD 1迁移率最快，而fm-SOD 移率最慢。每种不同的fm—SOD均由两条相关的酶带组成，分别命名 为主带和亚带。主带相对于亚带而言，迁移率较小而酶活力较高。 (2)在草鱼群体中三种fm-SOD的不同组合可构成三种不同的 草鱼线粒体型超氧化物歧化酶生化遗传学表型，即表型1、表型2 1同功酶；表型 与表型3。表型1个体只含有迁移率最快的fm—SOD 3同功酶；而表型2个体中含有 3个体只含有迁移率最慢的fm—SOD 所有三种不同形式的同功酶。在表型2中，当这三种不同形式的同 3高，而 2活力比fm-SOD1和fm—SOD 功酶均存在的时候，fm—SOD fm—SOD l与fm—SOD3活力相当。 (3)在草鱼心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肌肉、尾鳍六种不同的 组织中，草鱼线粒体型超氧化物歧化酶存在三种不同的同功酶形式 和三种不同的生化遗传学表型。同一草鱼个体的线粒体型超氧化物 歧化酶在六种不同组织中表现出相同的酶谱类型，但在不同组织中， 酶活性有所不同。其中肝脏中活性最高，而其他组织活性相当。 (4)在野生草鱼群体中，存在所有三种表现型：而在基因纯合 型的雌核发育草鱼群体中只检测到表型1和表型3个体。野生草鱼 群体中三种表现型的个体数之比为15：5l：28。经过r测试，发现 其比值符合常染色体上一个基因座位一对等位基因l：2：1的孟 德尔遗传分离比例。 具有一定的抗性，表明其金属类型为锰型。 由这些实验结果得出以下结论：(1)草鱼fm—SOD是由细胞核DNA 上的基因所编码而不是由线粒体DNA上的基因所编码的；(2)草鱼 fm—SOD由单个基因座位控制；(3)至少存在两个有较明显差异等位 基因；(4)草鱼fm—SOD由两个亚基组成。 关键词：线粒体；超氧化物歧化酶；生化表型；基因座位；草鱼 ABSTRACT dismutaseiSan Superoxide conserved evolutionarily with3rl rolein enzyme and importantprotecting cells organisms fromthe caused free damagesbyoxygenradicalS．Asamolecular clock and dismut