微生物实验室管理.pptVIP

一、人员 1、须经过微生物学专业基础知识和无菌技术培训后，方可上岗操作。 2、应严格按照各种技术方法所规定程序和条件进行操作，对各种实验方关键步骤及注意事项尤应谨慎、仔细遵循，切勿粗心。 二、实验室设施 无菌和微生物限度实验必须在无菌环境中进行，保持样品原污染状态，防止第二次污染。无菌环境包括无菌室、净化工作台、无菌隔离系统等，其中无菌室是最常用的无菌环境之一。 无菌室及配套的相关建筑设计应充分考虑其布局合理，操作安全，使用方便等条件。 2.1无菌室布局 无菌室应采光良好、避免潮湿、远离交通干道、厕所及污染区。 平房建筑时，外墙应有一段水泥地面的隔离带； 楼房建筑时，应在二楼以上，有上、下水道及其安装适宜的位置。 无菌室的配套设施包括培养基配制、洗刷、消毒室、实验物品和培养基存放处、阳性菌对照实验室和办公室等，应尽量集中，减少污染，便于管理和使用。 2.2无菌室的结构 1.无菌室内部应六面光滑、平整、无缝隙、不起灰、耐腐蚀、易清洗，墙与地面、台面、墙壁之间的连接处应呈凹弧形，不留死角，室内不得安装上、下水道，进出口应为拉门，门与墙平齐，门缝要封紧，操作间和缓冲间的门不应直对。室内灯的电光源开关应设在室外. 2.无菌室内采光的面积要大，照明灯应嵌装在天花板内，光照应分布均匀，光照度不低于300勒克斯，缓冲间和操作间均应设置紫外灯（2~2.5w/m3），距实验台面的高度不超过1m。应定期检查辐射强度，在操作面上达40μW.cm-2。 2.3无菌室的要求 1.一般应有1~2个缓冲间及无菌操作间。无菌室内应有人净、物净设施，所有实验器材应经消毒处理后方可进入实验室。 2.4无菌室管理制度 1.无菌室内的陈设应尽量简单，仅存放最必须的检验用具，无菌室内的用具不得随意带出。 2.一切无菌操作应严格按照无菌操作规程进行 。 3.准备移入无菌室的实验物品应事先用0.1%新洁尔灭或2%甲酚液消毒。 三、实验物品的洗刷 1.凡是实验中使用的器材，能灭菌处理的，必须灭菌处理，如玻璃器皿、无菌衣、帽、口罩等用牛皮纸包好后1210C30分钟。灭菌后的物品可存放在第一缓冲间内，保存时间一般不超过两周。 四、实验物品的消毒 1.消毒：指对病原微生物的繁殖体的致死作用，但不能杀死芽孢等全部微生物。 2.灭菌：凡能杀灭物体中所有活的微生物的作用。 常用消毒剂 * * 微生物实验室 质量管理 3、应了解本专业国内外的最新文献资料、参加专业培训，不断更新专业知识，提高检验质量。 4、制定实验室质量管理规范实现实验室标准化、规范化和管理科学化，是确保药品检验数据及检验结论的科学、公正、优质的重要基础和技术保证。 2.缓冲间和无菌操作间应具有单向流空气净化设施，其中无菌操作间的面积不超过10m2，不小于5m2，高不超过2.4m，温度控制在180C~260C，相对湿度45%~65%，洁净度局部百级、周围环境达到万级，应保持对环境形成正压，不低于5Pa。缓冲间内应有洗手盆、毛巾、无菌衣放置架、拖鞋等，不应放置培养箱和其他杂物。 3.无菌室洁净度应定期检查沉降菌、浮游菌及悬浮粒子。 4.实验操作前应用消毒剂擦拭台面后，将实验物品打开包装，同时启动空气净化系统20min以上。 5.无菌操作间的洁净度应符合要求，实验前及操作过程中需检查空气中沉降菌数。 沉降菌的检测方法:将已经过预培养证实无菌的3个营养琼脂平板，以无菌方式放置在操作台面上，左、中、右各放1个，打开平皿盖，让平板在空气中暴露30分钟后，将平皿盖盖好，置350C培养48小时，观察结果，百级洁净度3个平板平均菌落数不应超过1个/皿；万级洁净度3个平板平均菌落数不应超过3个/皿。该无菌室方可使用。微生物限度实验室每周检测一次，无菌实验室每次实验均应检测。 6.工作人员进入无菌室前应先用肥皂洗手，进入无菌室第一缓冲间后再先用0.1%新洁尔灭洗手（应新鲜配制，最好是当天配制），再穿戴无菌衣、帽、口罩、拖鞋，再将手消毒后，经过第二缓冲间，方能进入无菌室进行实验操作。实验过程中不得随意进出无菌室。实验完毕后，同样用消毒液擦拭台面，将实验物品带出。 7.无菌室应定期检查，发现不符合要求时应立即停止使用，查找原因，例如：高效过滤网是否失效、风速是否降低、紫外灯杀菌力是否减少，不符合要求应及时更换。 8.非无菌室工作人员不得进入无菌室，对临时外来人员或维修人员进入无菌室，应进行指导和监督。 9.阳性对照菌试验应在指定的专用实验室操作。 2. 实验中使用的器材，无法进行灭菌处理的，使用前必须经过消毒处理，如无菌室内的凳、试管架、天平等，应用消毒剂擦拭干净；试管的胶帽应用75%乙醇浸泡过夜后方能使用。 3. 新购玻璃器皿应先用