微生物遗传育种实验.pptVIP

微生物遗传与育种实验 何琳燕 生科楼C7012 TellEmail：hlyan0974@ 实验目的 掌握微生物遗传与育种的相关研究技术：诱变、杂交、转化、性状检测、遗传分析等 将遗传学知识与育种技术相结合，达到具备独立进行遗传学实验设计、微生物育种技术路线设计与现代微生物分子遗传技术操作能力的目标。 实验内容 多糖产生菌突变株的筛选和鉴定 根瘤菌多糖产量鉴定 根瘤菌抗生素抗性检测和突变株筛选 两亲本杂交 电转化 杂交子鉴定 技术路线 时间安排 分组安排 培养基配制 TY培养基（培养根瘤菌）：胰蛋白胨5.0 g，酵母粉3.0 g，CaCl2 0.3 g，水1000 ml，pH 7.0。杂交用，250ml液体/500ml三角瓶，每组2瓶。诱变用，250ml固体/500ml三角瓶，每组2瓶。抗性测试用， 50ml固体/250ml三角瓶，每组2瓶。 蔗糖酵母膏培养基（培养根瘤菌）：蔗糖10.0 g，酵母膏4.0 g，磷酸氢二钾0.5 g，硫酸镁0.2 g，氯化钠0.2 g，钼酸钠（0.5%溶液）4.0 ml，硼酸（0.5%溶液）4.0 ml，碳酸钙5.0 g，水1000.0 ml，pH 7.2-7.4。多糖测定用， 250ml/500ml三角瓶，每组4瓶。 LB培养基（培养大肠杆菌）：胰蛋白胨10 g，NaCl 5 g， 酵母膏 10 g，水1000.0 ml