乳腺癌细胞系分泌组学地研究.pdfVIP

乳腺癌细胞系分泌组学研究 摘要 分泌蛋白是癌症生物标志物的一个重要来源。为了寻找乳腺癌诊 断、治疗和预后的生物标志物，我们建立了多种研究乳腺癌细胞系分 泌蛋白组学的方法。 首 先 ， 我 们 建 立 了 优 化 的 半 鸟 枪 法 对 乳 腺 癌 细 胞 系 MDA-MB-231 的分泌组进行分析。通过改进的细胞无血清培养方法 和蛋白分离方法，从 MDA-MB-231 细胞无血清培养液中共鉴定出了 464 个蛋白，其中 84 个（22.8% ）是胞外蛋白，127 个（34.4% ）是 膜蛋白，比以往的细胞分泌组学研究结果有了改善。鉴定出来的丰度 最大的前 50 个蛋白中，分泌蛋白和膜蛋白比例增加，并且包括许多 已经被认为与肿瘤发生发展相关的潜在生物标志物。该结果说明我们 建立的优化的半鸟枪细胞系分泌组学分析方法，可以简单有效的从细 胞无血清培养液中寻找到潜在癌症生物标志物。 其次，我们建立了乳腺癌细胞系糖分泌组学的研究方法并将其应 用于潜在生物标志物的筛选。尽管我们优化了细胞的无血清培养条 件，但是不可避免的细胞死亡（死亡率3% ）释放出的胞内蛋白仍对 分泌蛋白的检测造成较大干扰。由于几乎所有的分泌蛋白都有糖基化 修饰，而且糖基化