高效液相色谱法培训课件.pptVIP

 高效液相色谱法 日常维护和常见色谱故障 溶剂及样品的准备 －－过滤溶剂的目的湿防止固体颗粒损伤仪器或柱头；未经过滤的溶剂或者溶剂瓶中生长微生物，，都会降低溶剂入口过滤头的寿命，并影响泵的性能，一般要求两天过滤一次。 注意：过滤水相或有机相应该选用不同的滤膜 －－聚四氟乙烯几乎可以过滤所有的溶剂、酸和碱 －－尼龙66可以和大多数的有机物、水相容，但是建议不要用于强酸、二氯甲烷和DMF －－纤维素滤膜用于水相 溶剂脱气的方法 －－氦气脱气 －－真空脱气 －－回流加热脱气 －－超身脱气（最为常用） 避免使用的溶剂 －－卤化物碱金属溶液及相应的酸溶液 －－高浓度的无机酸如硝酸、硫酸 －－能形成自由基的试剂及其混合物 －－四氯化碳和异丙醇或THF混合液 －－含强络合剂的溶液 色谱柱的平衡 为了确保分析结果的再现性，对于反相柱应使用5～10倍柱体积的流动相平衡色谱柱。 注意：新装到系统的色谱柱需要进行初始化。先断开柱子和检测器间的管路，用流动相将色谱柱中的原有流动相或气泡移出色谱柱，然后再将色谱柱和检测器间的管路接好。 保护色谱柱 过滤所有的溶剂和样品 使用保护柱 仪器使用完毕，要冲洗整个系统，移走系统中缓冲液 柱子不使用时，两端密封 注意柱子使用的pH范围 不要高压冲洗柱子，不要高温下过长时间的使用硅胶键合相 常见色谱故障－基线噪音 可能的原因 －检测池