病理生理讲座3-细胞凋亡（Apoptosis）.ppt

DNA片段化分析细胞凋亡时主要生物化学特征是其染色质发生浓缩, 染色质DNA在核小体单位之间的连接处断裂, 形成180?200bp整数倍的寡核苷酸片段, 在凝胶电泳上表现为梯形电泳图谱(DNA ladder)。 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL 凋亡过程4个阶段 凋亡信号转导 凋亡基因激活 凋亡的执行 凋亡细胞的清除 细胞凋亡的生物学意义 细胞凋亡与个体发育 细胞凋亡与免疫 细胞凋亡与人类疾病 细胞凋亡（科普诗） 似秋叶的凋零， 告别生命之辉煌； 那难以计数的攻击、诱导， 轻启着道道程序， 逼细胞步步走向生命的末端； 啊，活性氧处处肆虐， 钙波涛惊石裂岸， 线粒体把生命之光一点一点拧淡; 细胞凋亡（科普诗） 危难中的细胞啊， 你沉稳不乱， DNA片片切割， 化云梯直通天堂； 细胞体分团相聚， 把生命的凝重浓集在小体上； 分别了朝夕相处的伙伴， 再见了快乐美好的时光； 这一切的一切又融入临近的胞体， 腾出的空间再写生命的篇章。 第四节 细胞凋亡与疾病 一、细胞凋亡不足 肿瘤 ※抑制凋亡基因过度表达 Bcl-2基因表达↑(前列腺癌、结肠癌) ※促凋亡基因突变或缺失 wtP53基因突变(小细胞肺癌、非小细胞 肺癌) 自身免疫病—胸腺负选择机制失调 T细胞在胸腺发育过程中的正负选择 正选择：与非已抗原-MHC抗原结合的TCR的单阳性细胞保留存活，进入外周T细胞库 负选择：与自身抗原-MHC抗原结合的TCR的双阳性细胞通过细胞凋亡被清除 负选择失调→多发性硬化症、胰岛素依赖性糖尿病、慢性甲状腺炎 细胞凋亡不足 二、细胞凋亡过度 心血管疾病 心肌缺血-再灌注损伤 ①缺血早期-凋亡为主 ②梗死灶周边-凋亡为主 ③轻度缺血-凋亡为主 ④发生缺血-再灌注损伤较单纯缺血凋亡严重 心力衰竭 氧化应激/压力、容量负荷↑/神经-内分泌失调 /TNF/缺血/缺氧→心肌细胞凋亡 机制 ①氧化应激：SOD可减轻 ②受体Fas上调：FasL反应 ③P53激活:卡点作用 神经元退行性疾病 阿尔茨海默氏病(Alzheimer’s disease, AD) β-淀粉样蛋白/钙超载/氧化应激/NGF↓→神经元凋亡 帕金森氏症(Parkinson’s disease) 多发性硬化症 细胞凋亡过度 病毒感染 AIDS 细胞凋亡过度 Gp120糖蛋白-CD4结合→ CD4+细胞凋亡 Fas基因表达↑ HIV -感染→ CD4+细胞→合胞体形成 T细胞激活→AICD 巨噬细胞→TNF分泌↑ HIV -感染→tat蛋白表达→ CD4+细胞 产生氧自由基 三、细胞凋亡不足与过度并存 动脉粥样硬化 氧化型LDL↑ 血小板激活 AgⅡ 高血压 内皮细胞凋亡↑ 平滑肌细胞增殖 平滑肌细胞凋亡 第五节 细胞凋亡与疾病防治 一、合理利用凋亡因素 低剂量照射→急性T细胞性白血病 TNF-α→白血病细胞株U937 高温(43℃)→肿瘤 NGF→老年性痴呆 撤除雄激素→前列腺癌 二、干预凋亡信号转导 阿霉素→Fas/FasL表达↑→肿瘤细胞凋亡 SPP用于凋亡过度疾病(AIDS、老年性痴呆) 三、调节凋亡相关基因 基因转移 wtP53→P53基因突变肿瘤细胞 基因封闭 反义寡核苷酸→bcl-2表达 × 四、控制凋亡相关酶的活性 核酸内切酶和caspases Ca 2+载体/阻断剂→核酸内切酶活性↑/↓ Zn 2+↑→caspases活性↓ 五、防止线粒体跨膜电位的下降 环胞霉素 A N-methyl-Val-Cyclosporin 小结：细胞凋亡的过程 cAMP Ca2+ 神经酰胺 凋 亡 诱 因 凋 亡 信 号 转 导 凋 亡 基 因 激 活 细 胞 凋 亡 凋 亡 细 胞 清 除 受体 死 亡 信 号 DNase活化 Caspases活化 ↓ ∶ DNA片断 ↓ 凋亡小体形成 巨噬细胞 吞噬、分解 小结：凋亡时细胞的主要变化 ㈠细胞凋亡的形态学改变 微绒毛消失 脱水 空泡化(blebbing) 固缩(condensation)