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硼替佐米单用或与其他化学药物联用对多发性骨髓瘤细胞
株KM3细胞的影响体外实验研究
浙江大学医学院 内科学(血液病)
硕士研究生 欧阳桂芳
导 师 林茂芳教授
中文摘要
多发性骨髓瘤(Multiple
殖性疾病,主要特点是瘤细胞在骨髓中恶性增生、浸润并合成大量单克
隆免疫球蛋白,而正常免疫球蛋白受抑制,临床上出现骨骼病变、感染、
出血、贫血以及肾功能损害、高粘滞综合症等。虽然传统化疗及后续的
自体造血干细胞移植使部分患者能够取得一定的疗效,达到此次治疗的
平台期或获得缓解,但不强调缓解的程度,疾病最终复发或者耐药,不
被治愈。泛素.蛋白酶体通路(切)P)是真核细胞中蛋白质降解的重要
途径,阻断U)P通路是近年来对肿瘤靶向治疗的热点之一。蛋白酶体
高选择性26S硼酸盐蛋白酶体抑制剂,可作用于包括MM在内的多种
人肿瘤细胞系。已有临床研究报道,硼替佐米+地塞米松、硼替佐米+
地塞米松+脂质体阿霉素治疗MM患者,获得较高的缓解率,完全缓解
者的生活质量。目前,有关硼替佐米治疗复发性、难治性MM的报道
’
较多,而其基础研究的结果较少。
本文旨在研究在体外实验条件下,单用硼替佐米及其联用地塞米
松、柔红霉素,尤其联用三氧化二砷、对多发性骨髓瘤细胞株K地细胞
增殖的影响,并初步探讨其作用机理,冀为该药的临床应用提供较翔实,
有一定新意的,可靠的实验依据,从而为临床设计新的治疗方案拓宽思
路。
采用MTT比色法检
为探讨硼替佐米的作用机制,在本研究中,采用光学显微镜及透视
电镜观察硼替佐米作用前后K地细胞的形态变化。结果显示,经过硼替
佐米处理后KM3细胞表现为典型的凋亡细胞形态学特征,如胞浆
空泡化,细胞体积缩小,核染色质固缩和碎裂,核边集,胞膜皱缩,
凋亡小体形成等(图5、6)。
为了对细胞凋亡现象进行准确地定性或定量分析,我们采用了
琼脂糖凝胶电泳和流式细胞分析技术研究细胞DNA含量及磷脂酰
umol/L硼
umol/L.O.25umol/L)硼替佐米具有诱导KM3细胞凋亡的作用。
为了探讨硼替佐米引起凋亡的机制,我们采用流式细胞分析技
umo儿.O.5
术检测线粒体跨膜电位。结果显示,一定浓度(O.125
umo儿)硼替佐米能引起KM3细胞线粒体跨膜电位下降。
小结
(1)硼替佐米、三氧化砷、地塞米松、柔红霉素对埘细胞株I(M。细胞
均有抑制增殖的作用,呈浓度和时间依赖性。工C∞值在硼替佐米、
pmol/L、3.1Ou
三氧化砷、地塞米松、柔红霉素分别为O.27
m01/L、8.01um01/L、O.16umol/L。表明,硼替佐米对MM细
胞增殖的抑制作用,仅次于柔红霉素;三氧化砷的抑制作用比地
塞米松的强。
(2)与单用硼替佐米比较,联用柔红霉素时,在不同时间点,对细胞
的抑制率均为最高。
4
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