广西虎纹捕鸟蛛毒素成分分析及对人脑胶质瘤U251细胞作用机理地研究.pdfVIP

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2015-12-30 发布于安徽
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广西虎纹捕鸟蛛毒素成分分析及对人脑胶质瘤U251细胞作用机理地研究.pdf

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目录英文缩略词……………………………………………………………1 中文摘要………………………………………………………………2 英文摘要………………………………………………………………4 引言………………………………………………………………6 正文………………………………………………………………8 第一部分广西虎纹捕鸟蛛毒素的成分分析………………………..8 1 原料药、仪器及试剂………………………………………………8 1.1 来源和体形……………………………………………………….8 1.2 原料药…………………………………………………………….8 1.3 实验仪器………………………………………………………….8 1.4 主要试剂………………………………………………………….9 2 实验方法与结果……………………………………………………9 2.1 氨基酸测定……………………………………………………….9 2.1.1 原理……………………………………………………………..9 2.1.2 样品处理………………………………………………………..10 2.1.3 样品分析………………………………………………………..10 2.1.4 实验结果………………………………………………………..10 2.2 红外光谱法……………………………………………………….11 2.2.1 实验步骤………………………………………………………..11 2.2.2 红外测定………………………………………………………..11 2.2.3 红外实验结果…………………………………………………..12 2.3 紫外光谱法……………………………………………………….14 2.3.1 蛛毒样品溶液的制备…………………………………………..14 2.3.2 蛛毒样品溶液 0 阶导数的测定………………………………..14 2.3.3 蛛毒样品溶液 1 阶导数的测定…………………………………15 2.3.4 蛛毒样品溶液 2 阶导数的测定…………………………………15 2.3.5 蛛毒样品溶液 3 阶导数的测定…………………………………16 2.3.6 蛛毒样品溶液4 阶导数的测定…………………………………...16 2.3.7 导数光谱的分析…………………………………………………..17 3 讨论………………………………………………………………….. 17 3.1 氨基酸测定法……………………………………………………...17 3.2 红外光谱法………………………………………………………... 18 3.3 紫外光谱法………………………………………………………... 18 4 结论………………………………………………………………….. 18 第二部分广西虎纹捕鸟蛛粗毒对U251 细胞的作用机理………….19 1 实验材料与主要仪器……………………………………………….19 1.1 受试药物…………………………………………………………...19 1.2 肿瘤细胞株………………………………………………………...19 1.3 主要试剂…………………………………………………………...19 1.4 其他试剂的配制…………………………………………………...20 1.5 主要仪器设备……………………………………………………...21 1.5.1 仪器………………………………………………………………21 1.5.2 实验器具的无菌处理…………………………………………….23 1.6 检测项目……………………………………………………………23 1.6.1 MTT 法测定HWZD 对肿瘤细胞增殖的影响…………………..23 1.6.2 流式细胞分析法测定HWZD 诱导肿瘤细胞凋亡的影响………23 1.6.3 通过Caspase-3 试剂盒检测Caspase-3 酶活性的变化………….23 1.6.4 通过RT-PCR 检测胶质瘤细胞BaxmRNA 及bcl-2mRNA 表达变化………………………………………………………………………..23 1.7 统计学方法………………………………………………………...23 2 实验方法……………………………………………………………..23 2.1 细胞培养、冻存、复苏、传代…………………………………...23 2.2 M