菝葜抗肺癌活性部位的筛选及作用机制的研究.pdfVIP

目 录 摘要…………………………………………………………………………I ABSTRACT．………．……………………．…………．……．………………．……………………．……．】口【 缩略词表……………………………………………………………………．Ⅲ 前言…………………………………………………………………………1 第一章文献综述……………………………………………………………．2 1．抗肿瘤药物市场分析…………………………………………………一2 2．菝葜的抗肿瘤研究概况………………………………………………一6 3．鞣质类成分抗肿瘤作用研究进展……………………………………10 4冲药抗肿瘤机制研究…………………………………………………13 5．本课题的研究意义及思路……………………………………………16 第二章菝葜体外抗肺癌活性部位的筛选…………………………………17 1．菝葜抗肺癌有效部位的提取与分离…………………………………17 1．1实验材料…………………………………………………………17 1．2实验方法与结果…………………………………………………17 2．菝葜抗肺癌有效部位的筛选…………………………………………19 2．1实验材料…………………………………………………………19 2．2溶液的配制………………………………………………………19 2．3实验方法…………………………………………………………20 3．菝葜抗肺癌有效部位组分抗肺癌活性比较…………………………24 3．1实验材料…………………………………………………………24 3．2实验方法…………………………………………………………24 3．3实验结果与分析…………………………………………………25 4．本章小结………………………………………………………………25 第三章菝葜鞣质部位抗肺癌A549作用机制研究………………………26 1．实验材料…………………………………………………………………26 2．溶液的配制……………………………………………………………27 3．实验方法………………………………………………………………28 3．1流式细胞术检测细胞凋亡………………………………………28 3．2流式细胞仪检测细胞周期………………………………………29 3．3Western blot检测相关调控蛋白的表达………………………一29 I 4．实验结果………………………………………………………………3 4．1菝葜鞣质部位对细胞凋亡的影响………………………………31 4．2菝葜鞣质部位对细胞周期的影响………………………………32 4．3凋亡调控蛋白及周期调控蛋白的表达…………………………33 结语与创新…………………………………………………………………．35 参考文献……………………………………………………………………．36 攻读硕士期间发表论文……………………………………………………．4l 致谢…………………………………………………………………………42 摘要 china 菝葜，又名金刚藤，为百合科植物SmilaxL．的干燥根茎。作为 我国常用中药，收载于《中国药典》2005版及2010版一部。菝葜具有清 热解毒、软坚散结、活血化瘀之功效，是中医临床治疗肿瘤疾患的常用配 伍组方药味，以其为君药的中药复方制剂复方菝葜颗粒，临床用于治疗肺 癌效果明显。 本实验室前期研究发现，菝莫酚酸类成分为其抗癌有效物质。本论文 对菝葜抗癌活性物质部位进行了筛选，界定菝葜抗肺癌主要有效物质为鞣 质类成分，并对其进行了抗癌机制研究，探讨其抗癌途径。 采用溶剂法、明胶沉淀法和大孔树脂纯化技术，将菝葜提取分离为乙 醇粗提物、总鞣质部位和总黄酮部位。通过经典的台盼蓝染色法结合细胞 种NSCLC细胞的