高粱中微痕量物质的检测方法构建和其应用研究.pdf

Research on Construction and Application of Detection Methods on Trace Substances in Sorghum A Thesis Submitted to Chongqing University in Partial Fulfillment of the Requirement for the Master ’s Degree of Science By Zhou Rongling Supervised by Senior Engineer Zhang Suyi Prof. Huo Danqun Specialty: Biology Bioengineering College of Chongqing University, Chongqing, China April 20 13 中文摘要 摘 要 高粱籽粒中的微痕量物质单宁和重金属，是评价高粱品质的两个重要因素。 单宁含量的多少，既对出酒率亦对酒的口味有很大的影响；而重金属的种类和含 量在酿酒过程中，对酒体的质地和老熟的影响亦不可忽视。虽然这两种物质的传 统方法检测效果良好，但往往要受大型仪器设备和专业操作人员的限制，检测成 本高，且很难实现现场实时监测的需要。鉴于此，本文针对单宁和重金属当前检 测技术中存在的问题，首先，在铁(Ⅲ)可与硫氰酸根离子和单宁络合的基础上，对 单宁的快速、高效的检测方法进行了探索；另外，基于重金属离子对脲酶的抑制 作用，借助卟啉的光敏效应，对对Cd2+敏感的脲酶-卟啉材料进行了筛选，并对卟 啉与脲酶的相互作用进行了初步探究。通过本论文的工作，得到如下结果。 ①基于铁(Ⅲ)可与硫氰酸根离子和单宁发生络合反应，生成稳定的三元离子络 合物的性质，建立了硫氰酸铁分光光度法测定高粱中单宁的新方法。显色液与单 宁反应后溶液颜色变化显著，在575nm 处有明显的吸收峰，15min 内可实现检测。 在优化后的条件下，单宁浓度在 0.0001-0.06g/L 范围内服从朗伯- 比耳定律，回归 2 方程为 Y=13.664X +0.0389 ，相关系数 R = 0.9993 。该方法的平均回收率在 98.40%~100.27%范围内，RSD ＜0. 5% 。以此方法应用于高粱样品中单宁含量的测 定，与国标检测方法(GBT 15686-2008)结果一致。 ②经过实验探索了试纸与单宁反应的最佳条件，提出了用硫氰酸铁-壳聚糖试 纸法快速检测高粱中单宁的方法。结果表明，pH 值为 7.0~9.0 的条件下，单宁与 硫氰酸铁试纸反应5min 后生成紫红色稳定络合物，试纸颜色深浅与样品中单宁浓 -3 -1 度成正比。通过与标准色阶图谱比较，确定单宁浓度，试纸最低检出限达 10 g·L 。 通过对七种高粱样品中单宁含量的测定并与国标法测定比较发现，本方法测定的 结果和国标法检测结果一致，可实现半定量检测。且经过稳定性实验和干扰实验 发现，试纸稳定性良好。 ③基于光学传感原理，为了使制备的试纸能实现定量检测，对所制备硫氰酸 铁试纸进行了更进一步的优化。结果表明，在优化的条件下，传感器显示的信号 -3 值与单宁的浓度在 10 ～1g/L 范围内有良好的线性关系，且灵敏度高、线性范围 宽，检出