阿利吉仑对局灶性脑缺血再灌注损伤小鼠的脑保护作用和其相关机制的研究.pdf

材料与方法……………………………………………………………．．83 结果……………………………………………………………………．．91 附图……………………………………………………………………．．93 附表……………………………………………………………………99 讨论……………………………………………………………………100 小结……………………………………………………………………101 参考文献………………………………………………………………101 结论…………………………………………………………………………104 综述………………………………………………………………………．105 致谢………………………………………………………………………121 个人简历……………………………………………………………………122 中文摘要 阿利吉仑对局灶性脑缺血再灌注损伤小鼠的脑保护作用 及其相关机制研究 摘 要 缺血性脑血管病是临床常见病、多发病之～，具有高发病率、高 致死率、高致残率、高复发率、恢复缓慢的特点，严重影响患者的生 活质量，给患者家庭和社会带来沉重的负担，且近年来逐渐有年轻化 的趋势。在脑缺血发生时，未接受溶栓治疗者脑组织中的动脉栓子自 发向远端推移出现血管再通有可能引发缺血部位过度再灌注；而接受 溶栓治疗的患者血管再通虽可达到部分有效再灌注，但由于缺血脑组 织微血管结构完整性与功能出现损伤，血脑屏障破坏、自身调节衰竭， 而可能发生瀑布式神经损伤级联反应，导致缺血再灌注损伤。研究证 实脑缺血再灌注损伤是导致患者病情加重的主要原因，因此，脑缺血 后如何减轻神经细胞再灌注损伤及死亡是临床面临的重要课题。 近年来随着现代免疫学和分子生物学的迅速发展，对于脑缺血再 灌注损伤病理生理机制研究己取得了重大进步，目前普遍认为其病理 生理机制主要包括氧化应激、炎症反应、细胞凋亡、兴奋性氨基酸毒 性、细胞内钙超载、自由基损伤等，这几种因素并不是孤立存在的， 彼此之间相互作用、相互影响，构成了一个复杂的调控网络，造成一 系列病理级联反应，直接或者间接导致神经细胞凋亡／死亡，导致神 经功能缺失。在脑缺血后复杂的病理损伤机制中，炎症反应、氧化应 激、细胞凋亡是目前神经科学研究的热点，是脑缺血再灌注损伤的主 要原因，抗氧化应激、减轻炎症损伤、抗细胞凋亡成为治疗缺血性脑 血管病的主要途径之一。 尽管已经有多种药物经过实验研究，证明具有抗炎、抗氧化、抗 凋亡等作用，但多数未能在临床得到广泛应用，使理论和实践大大脱 节。出现这种现象最主要的原因是动物与人类生理机制及耐受性等方 面的差异以及脑缺血后级联反应的复杂性，单一使用阻断某一病理环 节的药物可能难以奏效。所以在目前的临床治疗中，理想的神经保护 剂应该具备针对缺血再灌注损伤多个损伤环节发挥保护作用的特性。 中文摘要 一_———————————————————————————————————————————一 阿利吉仑(Aliskiren)是近年来合成的第一个口服、非肽类、直 接肾素抑制剂，相对分子量为609．8。近年来，动物和临床实验发现， 阿利吉仑具有广泛的生理作用，不仅能够有效降低高血压、抑制心肌 纤维化和保护靶器官，还具有抑制动脉粥样硬化进展，抗炎等作用。 但是阿利吉仑是否可以起到脑保护作用，其作用机制如何均有待探 索。 临床上缺血性脑血管疾病多为局灶性，部分患者由于溶栓治疗或 栓子自发向远端推移出现血管再通出现再灌注现象，因此，制备局灶 性脑梗死并且可实现再灌注的动物模型更为接近临床实际情况。本研 究选用雄性C57／BL小鼠为研究对象，采用改良Longa线栓法建立脑 缺血再灌注模型，在大脑中动脉阻塞所致的脑缺血再灌注模型上观察 Bcl。2和Bax的表达，确定缺血后与炎症反应、氧化损伤及凋亡的关 系，并选用阿利吉仑进行干预，评价干预前后梗死体积、脑含水量、 神经功能缺损评分，以及阿利吉仑对HMGB1，TLR4，NF．v．B， 缺血再灌注损伤后的脑保护作用机制，并应用ERK特异性拮抗剂 子的变化，以及评价神经功能缺失、脑水肿和梗死体积情况。本研究 分三部分，现将各部