Aβ肽聚集在微环境因素的研究.pdfVIP

摘要 摘要 阿尔兹海默氏病(Alzlleimer’sdise勰e，AD病)的主要病因之一是病人大脑 的海马区和皮质区中p-淀粉样肽(Amyloid-ppeptide，Ap)的异常聚集形成的老 年脑斑，老年脑斑对脑细胞具有神经毒性，会导致记忆力下降等老年痴呆症状。 生命体系中，Ap肽的聚集过程是极其复杂的，它会受到微环境pH值、Ap肽的 长度和浓度、离子强度、温度、金属离子等因素的影响。鉴于电喷雾质谱(ESI．MS) 在分析非共价复合物中所具有的较好灵敏度、较高选择性及较可信的分析结果等 优点，本文用ESI．MS系统地研究了金属铜、锌、亚铁离子与Ap肽的相互作用， 并着重讨论了十六种氨基酸对金属离子与AD肽结合的影响。具体研究工作如下： (1)对ESI．MS的仪器参数及实验条件进行了优化，主要讨论毛细管电压、干 燥气温度、溶液pH条件及浓度配比对多肽与金属离子非共价复合物的形成及其 稳定性的影响，建立了研究AB肽与金属离子相互作用的ESI．MS分析方法。 法，即一是两种Ap肽同时与金属离子孵育、二是一种Ap肽与金属离子先孵育， 再加入另一种AB肽与之竞争，对比这两个肽段与金属离子结合能力的强弱，结 结合位点。 (3)系统地研究了游离氨基酸对金属离子与Ap肽相互作用的影响。实验结果 表明，所涉及的十六种氨基酸由于极性和配位能力的不同，对AB(10．21)肽和金 属离子的结合具有不同的抑制作用： Glu、Asp、Leu、研和m这六种氨基酸 Cu2+的结合，但对AD(10．21)肽和Z砰+结合的抑制作用不明显；其它的十种氨基 酸对于Ap(10．21)肽和金属离子的结合作用无明显影响，因此游离氨基酸有可能 是一种新的影响AD肽聚集的微环境因素。 关键词：阿尔兹海默氏病；电喷雾质谱；Ap肽；金属离子；氨基酸 Abst豫ct Abstract A h2LllmarkAlzlleimer’sdiseaseistllesellile in cortex of cerebral m萄or pla‘lues and abnomal ofttle acc啪ulation mppoc唧us，m削ycomposed of锄yloid-p(Ap) acc啪ulateiIl leadstoneuronal pemides．Appeptides AD，w11ich eXcitotoxic毋and ceUdeam让嫩intIJnIcauSe decli舱and co嘶tiVe subscquent de删钆AB acc啪ulationis is IIlicroenViro砌entf．acto稻 modulatI甜by Ve叮complicated，wmch tllat include and andmetal pH，Aplength ioIlization in of ioIls．Elec仃0sprayspec仃0m唧(ESI-MS)hasadV锄tagesaIlalysis non．coValent