禽鹦鹉热嗜性衣原体DNA疫苗的构建和免疫应答评价.pdf

摘 要 禽鹦鹉热嗜性衣原体是一种重要的人畜共患病，随着我国集约化养殖业的不断发展，禽鹦鹉 热嗜性衣原体的感染呈现上升的趋势。本病的流行已严重阻碍养殖业的发展和威胁人类健康。目 前尚未有商品化的禽鹦鹉热嗜性衣原体疫苗上市，因此，开发高效、价廉的新型疫苗势在必行。 MembraneProtein，MOMP) 已有研究证明衣原体Omp-1基因编码的主要外膜蛋白(MajorOuter 是其主要保护性抗原成分且具有种属特异性，本实验克隆Dm班』基因并构建了peDNA3．1． 衣原体DNA疫苗的途径． I酶切位 方法：①根据禽鹦鹉热嗜性衣原体Omp-1基因序列，设计了一对含有点tDR，，Xho 1 取酶切该片段，回收得到含有以上两个酶切位点粘端的Omp-1基因，将此基因克隆至相同酶切回 收后的pcDNA3．1(+)真核表达载体中。 RT-PCR和Western-blot方法鉴定目的基因在BHK2l细胞中的瞬时表达。 ③根据文献报道合成了一条禽用硫代磷酸化修饰的cvo序列 检测特异性抗体和淋巴细胞增值水平。二免14天后进行攻毒，攻毒后第7天采集泄殖腔棉拭子， 免疫荧光抗体检测sPF鸡捧除农原体的状况；攻毒18天后，宰杀所有的sP鹂，采集脾脏，肺脏， 免疫组化染色观察清除禽鹦鹉热嗜性衣原体的状况。 列测定、比较，证实了重组质粒的正确性。 达MOMP蛋白。 虽然只诱导了低水平的特异性抗体和中等水平T淋巴细胞增值，但其清除衣原体的效果最好。 疫苗组具有更好的农原体清除效果，cpG2006具有增强鹦鹉热嗜性衣原体DNA疫茁的效果。 ODN，鸡 关键词：鹦鹉热嗜性衣原体，主要重组外膜蛋白，D，驴J，cPG Abstract zoonoticand agents is in ina economicallossduetointensive to BOW,no prevalentwildlyChina,resultinghuge farm．Up commercialvaccineis tglrfac,oof is tobe in Oilthe identifiedthenewvaccinationcandidate (MOMP)located Ch／amyd／a outermembrane itscharacteristicsof current chlamydial antigen．In coraplex(COMC)forprotective have the toillustratetheinlmune of peDNA3．1- study,wedesignedfollowingexperiments response vaccine． Omp-IDNA of EcoRlandXho1