补体调节蛋白CD59+CD46在T细胞活化信号转导中的作用的研究.pdfVIP

摘 要 旨在探讨CD59与CD46在T细胞信号转导中的协同效应。 鉴定。应用阳离子脂质体法转染Jurkat细胞，将细胞分为未转染的Jurkat细胞(I 胞增殖、WesternBlot测ZAP一70磷酸化的水平。结果：经PCR、限制性内切酶双酶 pSUPER—siCD46分别转染的Jurkat细胞，可表达绿色荧光蛋白，经G418筛选，得 用于T细胞，I组细胞的增殖能力，ZAP-70磷酸化条带的灰度值明显高于III、、Ⅳ组， I、1I组之间比较(尸O．05)，差异无统计学意义。 分别建立了稳定转染重组质粒 结论：成功构建了重组质粒pSUPER-siCD46； 和CD46基因；通过MTT、WesternBlot实验证实，在CD59与CD46的共同作用下， 号转导过程中存在协同作用。该研究创新之处在于，为跨膜蛋白CD46在GPI锚固蛋 白CD59的T细胞跨膜信号转导中的作用提供了实验依据，为T细胞白血病的基因靶 向治疗开辟了一条新的途径，具有重要的理论意义及广阔的临床应用前景。 硕士研究生 王美娟(免疫学) 指导教师 高美华教授 关键词：CD59；CD46；Jurkat细胞；T信号转导；协同效应 2 ofthe effectsof in transductionof CD59，CD46 Study synergistic singnal TeelI Abstract the effect inositol Objectives：Tostudy synergisticofglycosylphosphatidyl CD59onCD46-mediatedTcell (GPD—anchoredprotein signal Two of CD59shRNA were pairssingle·strandedoligoencoding sequencesynthesized to constructrecombinant andinsertedintolined vectors pSUPERexpression JMl09wastransfectedwithtworecombinantvectorsandone vectors．ThenE．coli Jurkatcellsweredividedinto4 vector(siCD59一C)．Human groups： negative-control Jurkat cellstransfectedwith cells(I pSUPERplasmid(IIgroup)、Jurkat group)、Jurkat witll Jurkatcells cellstransfectcd pSUPER-CD59siRNAplasmid(IIIgroup)and with