《下调GnTIVa表达对肝癌Hca-F细胞增殖及侵袭的影响-论文》.pdfVIP

中国肿瘤生物治疗杂志 http：／／www．biother．org ChinJCancerBiother，Dec．2013，Vo1．20，No．6 ·673 · DOI：10．3872／j．issn．1007-385X．2013．06．007 · 基础 研究 · 下调 GnTIVa表达对肝癌 Hca-F细胞增殖及侵袭的影响 樊建慧。，汪淑晶 ，于生金 ，何静娜 ，郑伟龙 ，张嘉宁 (1．大连医科大学糖生物学研究所 生物化学与分子生物 学教研室，辽宁 大连 116044；2．辽东学院 医学院基础医学部 ，辽宁 丹东118003) [摘 要] 目的：探讨慢病毒介导的N一乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅳa(N—acetylglucosaminyltran8ferase1Va，GnT1Va)表达下调对 小鼠肝癌 Hca—F细胞体外增殖及侵袭能力的影响。方法 ：针对GnTIVa的编码基因Mgat4a，构建含shRNA干扰序列的慢病 毒表达载体 pl13．7／Mgat4a—shRNA并包装慢病毒颗粒，感染 Hca—F细胞。RT—PCR及流式细胞术分别检测 Mgat4a—shRNA重组 慢病毒感染对Hca—F细胞Mgat4amRNA及GriT1Va表达的影响，CCK一8法和Transwell侵袭实验分别检测Mgat4a—shRNA重组 慢病毒感染在体外对Hca—F细胞增殖和侵袭能力的影响。结果 ：慢病毒能够高效感染小鼠肝癌细胞 Hca—F，Mgat4a—shRNA组 感染效率达72％。与Hca—F细胞和 Mock—shRNA组相比，Mgat4a—shRNA组细胞内Mgat4amRNA[(0．53±0．2)vs(2．97± 0．2)、(2．904-0．1)；均P0．05]和GriTIVa[(47．80±2．25)vs(394．61±5．27)、(378．614-4．38)；均P0．05]表达显著降低 ； 增殖能力[细胞增殖抑制率 ：(46．9±0．02)％us(0．82±0．03)％、0，P0．01]和体外侵袭能力[穿过滤膜的细胞数：(184-3) 128(424-4)、(38±3)个 ，均P0．05]显著下降。结论 ：慢病毒介导 shRNA下调GnTVIa的表达能够抑制小鼠肝癌细胞 Hca—F 的增殖及体外侵袭。 [关键词] N一乙酰氨基葡萄糖转移酶VIa；肝癌；增殖；Hca—F细胞；侵袭 ；慢病毒；RNAi [中图分类号] R735．7；R730．54 [文献标志码] A [文章编号] 1007—385X(2013)06-0673—06 Effectsofdown-regulation oflentivirus·m·ediated GnTIVa on theproliferation and invasionofmousehepatomaHca-F cells FanJianhui，WangShujing。，YuShengjin ，HeJingna，ZhengWeilong，ZhangJianing(1．InstituteofGlycobiolo— gY，DepartmentofBiochemistryand MolecularBiology，DalianMedicalUniversity，Dalian 116044，Liaoning，China； 2．DepartmentofBasicMedicalSciences，MedicalCollegeofEasternLiaoningUniversity，Dandong118000，Liaoning， China) [Abstract] objective：Toinvestigatetheeffectofdown—regulationoflentivirus—mediatedN—acetylglucosaminyltrans- feraseIVa(GnTVIa)ontheproliferationandinvasionofmousehepatomaHca—Fcells vitro．Methods：Expression plasmidpl13．7／Mgat4a-shRNAwithinterferenceshRNA sequencesgenetargetMgat4agene，wereencodingGnTVIawas constructed．TheRNAilentiviralparticl