人参炔三醇对CYP3A介导的咪达唑仑不同羟化代谢影响的机制的分析.pdfVIP

摘要 摘要 背景： 前期通过固相萃取、色谱逐级分离、波谱分析及结构鉴定等多种技术手段， 影响的物质，即抑制其4．羟化代谢，而激活其1’．羟化代谢。本课题通过大鼠肝 微粒、人肝微粒体及大鼠原代肝细胞代谢模型，探讨PXT对CYP3A介导的MDZ 不同羟化代谢通路影响的机制。 目的： 通过肝微粒体体外代谢方法从酶多结合位点角度分析人参炔三醇对CYP3A 酶动力学的影响；并通过测定大鼠原代肝细胞中CYP3A探针底物咪达唑仑不同 羟化代谢情况，反应人参炔三醇对CYP3A酶活性的影响；最后RT．PCR实验测 定CYP3A1／2mRNA的表达情况，综合分析人参炔三醇对CYP3A介导的MDZ 不同羟化代谢通路的影响机制，为临床安全合理用药提供科学依据。 方法： l、PXT对大鼠及人肝微粒体中CYP3A介导的MDZ羟化代谢影响。 ①建立咪达唑仑在大鼠及人肝微粒体中的孵育方法及样品处理方法。建立温孵 体系中咪达唑仑4．羟化及l’．羟化代谢产物的HPLC检测方法。 ②分析不同浓度人参炔三醇(0、1、4、8肛幽柚)对肝微粒体中咪达唑仑不同 羟化代谢酶促反应动力学参数的影响(Km、Vm跗CLint)。 2、PXT对大