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六、核移植技术存在的问题 1.成功率低,为1-5%。 (1) 营养过多发育过快,克隆动物一般都有发育过快的问题,体外培养的时间过长或培养液的成分可能与克隆动物的流产以及出生后不久死亡有关。 (2) 线粒体问题 目前还不知道原本就存在于卵子里的线粒体到底在多大程度上与个体的性质有关,细胞核的遗传基因与线粒体的遗传基因相互影响的问题必须引起重视。 (3) 核的重新编程不完整,染色体倍数不正确、性别等都可能对克隆动物的质量产生影响,因为目前所得到的体细胞克隆动物大多为雌性,因此性别可能对体细胞克隆的成功率一定的影响。(端粒问题争论颇多) * 2.理论研究滞后技术研究 3.体细胞克隆后代可能出现老化现象(受到体细胞分裂代数影响, 克隆动物异常,胎儿或新生儿死亡率极高, 极少数能全程发育的个体也表现为超重、呼吸系统疾病等异常表型, 个别表型正常者也存在有免疫缺陷、关节炎或肾、脑畸形等问题,导致克隆动物后期死亡) 4.核移植技术环节尚需要不断完善。 * 七、核移植相关理论的研究进展 卵母细胞的成熟与激活机理的研究为核移植胚胎的激活提供了理论参考依据; 细胞分化机理的研究将有助于从分子水平揭示分化的物理化学变化,从而为更好的去分化研究提供参考; 胚胎早期基因表达可揭示生命启动的分子变化(胚胎发育由母源控制向合子控制的转变标志胚胎细胞分化开始); 核移植胚胎的核质互作则是核移植胚是否成功发育的关键(核是细胞分化的物质基础,胞质提供了分化的微环境,控制着细胞的分化); 体细胞去分化研究为体细胞核移植提供了可能(体细胞去分化培养,获得全能性,G0期细胞。 * 八、影响核移植效果的因素 核移植受体细胞对克隆胚胎发育的影响(受体细胞类型对核移植胚胎重建和发育的影响;卵母细胞来源和发育时期对核移植胚胎重建的影响) 核移植供体细胞对克隆胚胎发育的影响(供体细胞发育时期和细胞周期对胚胎克隆的影响;核移植供体细胞类型) 核质互作与同步化 卵母细胞的活化与克隆胚激活方法 * 克隆的伦理 克隆羊的诞生也从理论上,表明了人类可以自身进行无性繁殖的可能性。 如果克隆技术应用于人类,必将对人类社会的基本组织单位——家庭产生很大的冲击,同时也一定会直接威胁人类社会现有的法律、伦理和道德。 多个国家政府已经明确宣布政府科研基金决不会支持任何将克隆技术应用于人类的研究。 * * * * * 多莉 克隆猴 细胞工程 安利国 科学出版社 动物胚胎工程 马保华 自编教材 * 参考书目 思考题 1.克隆与核移植的概念以及类型 2.核移植操作程序 3.核移植技术的应用 * * 克隆(clone)是指遗传上完全相同的分子、细胞或来自同一祖先的生物个体的无性繁殖群体,也指通过克隆方式生产克隆群体的过程或手段。 从理论上讲,任何一个具有核的细胞都含有其生物体基因组的全部基因,因此都可以克隆。 * 克隆(clone)是指遗传上完全相同的分子、细胞或来自同一祖先的生物个体的无性繁殖群体,也指通过克隆方式生产克隆群体的过程或手段。 从理论上讲,任何一个具有核的细胞都含有其生物体基因组的全部基因,因此都可以克隆。 * 在1952年,美国人罗伯特·布里格斯和T·J·金,首先利用两栖类卵细胞建立细胞核移植技术。由于两栖类的蛙卵数量较多,体积较大,容易获得,操作方便。 1958—1962年,英国剑桥大学的约翰·格登教授和麦金尼尔利用瓜蟾原肠内胚层细胞核移植,培育出可育的非洲瓜蟾。 中国的细胞核移植技术工作,开始于本世纪50年代,主要是在两栖类和鱼类上进行的, 从1961年开始,童第周等以金鱼和鳑鲏鱼为材料,进行鱼类不同亚科间的细胞核移植获得成功,用以研究杂交细胞核于纯种细胞核在发育功能上的差异,以及细胞质对细胞核的影响。 。1989年,童第周、牛满江又将鲫鱼胚胎细胞核移入鲤鱼去核的未受精卵中,实现了不同种间的核质杂交,成功地无性繁殖了“鲤鲫移核鱼”新品种; 这个新品种既具有鲫鱼的鲜美味道,又具有鲤鱼的生长快速特点。 生长速度快,肌肉蛋白质含量比鲤鱼高3.78%,脂肪含量比鲤鱼低5.58%。 在60年代,美国康乃尔大学的科学家斯图尔德用胡萝卜完成了一项惊人的试验。胡萝卜是进行有性繁殖的,也就是新植株是花粉与花朵的卵细胞结合的结果。斯图尔德设计了超乎寻常的手段,先是从胡萝卜的根部取出一部分组织,移入放有培养液的长颈瓶内进行培养。经培养的胡萝卜根细胞在长颈瓶内逐渐增殖,然后将从中分离出来而漂浮在培养液里的单细胞,移入另一长颈瓶中,并在培养液中加入椰子汁。结果细胞不仅大量增殖,而且在长颈瓶内集结成块,慢慢形成植物状。至此将它取出移栽到泥土里,就长成了具有根、茎、叶的胡萝卜。这就是轰动
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