疏水色谱201306051.pptVIP

疏水色谱的进展研究 添加文本 随着生命科学的发展,用生物技术生产的产品需要进行分离和分析。作为分离、纯化和制备生物大分子有效手段的高效液相色谱法(HPLC)在生物工程的下游技术中占有重要的地位。但是,众所周知,在生化分离过程中,普遍存在蛋白质易失活问题,特别是用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)纯化时,由于流动相中大量有机溶剂的存在,使蛋白质的生物活性难以保持。高效疏水色谱法(HPHIC)则克服了这一缺点。由于它是用含盐水溶液作为流动相,固定相的疏水性适中,具有分离条件温和、不损伤蛋白质活性、分离效率高以及柱容量大等优点,因此在生化分离中,特别在活性蛋白质的分离中,日益成为人们优先考虑的色谱分离手段。 前言 目录 疏水色谱法的理论 疏水色谱法的固定相 疏水色谱法的应用 添加文本 疏水色谱填料是由化学性质稳定,机械强度好的载体(如琼脂糖、硅胶等)和疏水配基(如C6、C8等)组成。一般来说,蛋白质表面存在着一些疏水区域,借助于疏水区域和疏水配基间的疏水相互作用力,蛋白质被吸附在色谱填料的表面,并且高盐浓度可以加强这一作用力。因此,可以利用不同蛋白质间的疏水性差异,通过改变洗脱时的盐浓度就可以对蛋白质进行有效地分离纯化。 一、疏水色谱法的理论研究 二、疏水色谱法的固定相 非多孔填料 有机填料 无机填料 大孔膜 添加文本 疏水色谱法固定相的发展与其它色谱法一样,HPHIC发展的技术核心仍