《禽流感病毒LAMP快速诊断方法的建立-论文》.pdfVIP

浙江农业学报ActaAgriculturaeZhefiangensis，2014，26(3)：576—580 http：／／www．zjnyxbCn 王辰雨，胡敬东，史玉颖，等．禽流感病毒LAMP快速诊断方法的建立[J]．浙江农业学报，2014，26(3)：576．580． DOI：10．3969／j．issn．1004-1524．2014．03．07 禽流感病毒 LAMP快速诊断方法的建立 王辰雨 ，胡敬东 ，史玉颖 ，宋敏训 ，，张鹤晓 ， (山东农业大学动物科技学院泰安271000；山东省农业科学院家禽研究所 济南 250023；北京检验检疫局技术中心北京 100026) 摘 要：参考禽流感病毒(AIV)基质蛋白(M)基因设计了两对引物，特异性识别其6个不同位点，建立了基 于颜色判定的环介导等温扩增反应(LAMP)方法。试验对不同禽源病毒进行了测试，结果发现该方法仅特异 性地检出禽流感病毒 (H9和H5亚型)核酸，对AIV病毒的检测极限为 10EID 人工感染病料检测结果与 鸡胚病毒分离法的符合率为96．7％。数据表明，建立的LAMP方法特异、敏感、简便，在禽流感的诊断中具有 很大的临床应用潜力。 关键词：禽流感病毒；基质蛋白基因；环介导等温扩增反应 中图分类号：S851．34 7．2 文献标志码：A 文章编号：1004—1524(2014)03—0576-05 Establishmentofrapidloop-mediatedisothermalamplificationmethod fordetection ofavian influenzavirus WANG Chen．yu ，HU Jing—dong ，SHIYu．ying ，SONGMin．xun ，ZHANGHe．xiao， (ShandongAgriculturalUniversity，Taian271000，China； InstituteofPoultryScience，ShandongAcademyof AgriculturalScience， n0n250023，China； BefiingInspectionandQuarantineTestingCenter，Bejiing100026， China) ‘ Abstract：WithreferencetOthematrixproteingeneofAvianInfluenzaVirus(AIV)，wedesignedtwopairsof primerstospecificallyrecognizeitssixdifferentsites，andestablished theLoop—mediatedIsothermalAmplification Reaction(LAMP)methodbasedonthedeterminedcolor．Withdifferentavianvirusestested，theresultsshowedthat themethodonlyspecificallydetectedAIV (H9andH5subtype)nucleicacids，andthedetectionlimitforAIVwas 10EID50．WealsodetectedthesamplesforartificialinfectionsanddiscoveredthatthecoincidencerateofLAMPto thevirusisolation was96．7％ ，The experimentaldatademonstratedthattheestablished methodswerespecific． sensitive，andsimple，whichhadgreatpotentialofrclinicalapplication． Keywords：avianinfluenzaviurs；matrixproteingene；loop—mediatedisothermalamplification 禽流感的临床症状和病理变化因感染禽的