热休克蛋白27及磷酸化对p53的调控及其介导MCF-7细胞多柔比星耐受研究.pdfVIP

摘要 摘要 p53作为一个重要的抑癌基因，一方面调控着促进细胞凋亡的过程，另一方面通 过调控细胞周期从而调节应激条件下细胞修复机制。在很多肿瘤细胞中都伴随着热休 克蛋白27(Hsp27)的高表达，它是热休克蛋白家族中可以被磷酸化修饰的小热休克 蛋白的典型代表。Hsp27调节p53蛋白水平和其激活已有报道，但对于涉及Hsp27磷 酸化修饰在此过程中作用的研究并不系统和完整。本课题就Hsp27及其磷酸化形式对 于p53蛋白的调控，下游信号的激活和相关信号通路等都做了较为深入和系统的研 究。 首先，本研究发现Hsp27参与了调节p53蛋白稳定性和激活的过程。在人胚肾细 并且抑制了由此引起的细胞周期阻滞。在细胞内通过瞬时转染过表达外源性Hsp27 量效应的抑制作用。通过对于p53下游p21，MDM2的抑制和对p53本身泛素化的促 进，表明Hsp27对p53具有负向调控的功能，从而缓解由于p53引起的细胞周期阻滞。 Hsp27是一种可以被磷酸化修饰的小热休克蛋白，其磷酸化和非磷酸化形式均在 细胞的增殖、凋亡、分化、炎症等多种生理病理过程中发挥了不同的生物学功能。在 本文中，我们发现并报道了磷酸化的Hsp27发挥着与非磷酸化的Hsp27不同的作用： 联反应。这些结果都表明Hsp27磷酸化后对于p53的激活发挥了重要的作用。 多柔比星(Dox)是一种常用的DNA毒抗癌药物，容易在细胞核内聚集并导致 细胞凋亡。在最后一部分中，我们发现亚致死剂量的Dox可以引起具有野生型p53 ATM，p53形成三元复合物的水平，从而引起p21的积累。而当使用多种手段抑制 调和其介导的细胞保护作用，引起细胞凋亡的增加。这些结果表明磷酸化的Hsp27 通过增加与ATM的结合从而激活p53，通过psa／p21通路对细胞进行保护性调节。 综上所述，本研究首次揭示了Hsp27磷酸化形式对于p53激活和蛋白水平的调控 作用；提出了Hsp27在胞内发挥保护作用的新的作用机制。这些结果对深入研究Hsp27 在细胞周期，肿瘤耐受等多种生理病理条件下的调节作用具有重要的指导意义。 摘要 关键词：细胞存活，热休克蛋白27，细胞周期，凋亡，信号转导 II Activates Phosphorylated-·Hsp27ATM--Dependentp53 and MediatesResistancesofMCF-7Cells11rOm Signaling Doxorubicin-Induced Apoptosis Abstract Asthe oftumor boththe and target suppressergeneTP53，p53regulate apoptosis DNA activates furtherleadto repairprocess．DNAdamage p53target genes，which orDNA tumor smallheatshock apoptosisrepairprocess．Inmany cells，the proteinHsp27 is ata levelto anticancer expressedhigh provideprotectionagainst drugs．However,the roles in cellular toDNA arecontrov