缺血后适应基础上骨髓间充质干细胞移植对大鼠移植肺缺血再灌注损伤的保护作用.pdf

中文摘要 缺血后适应基础上骨髓问充质干细胞移植对大鼠 移植肺缺血再灌注损伤的保护作用 第一部分 改良三袖套法建立大鼠左肺原位移植动物模型 目的采用改良袖套法技术建立大鼠同种异体左肺移植模型。方法对供肺获取、套 管制作、自体肺切除、血管和气管袖套套接技术进行改进。30例清洁级sD大鼠左供肺 获取后置于40C的LPDG液保存3小时，随后行肉眼直视下同种异体左肺移植术，再灌 注4h后阻断右肺门，分别测定阻断前后气道压力、动脉血气变化、肺湿／干重比率及光 镜下肺组织结构变化。评价该模型复制移植物缺血再灌注损伤的能力。结果同种异体 左肺移植模型在肉眼直视下单人完成，供受体动静脉和支气管套管吻合时间分别为：肺 肺移植缺血再灌注损伤的变化。结论本模型符合大鼠肺移植模型建立的优点，全部操 作在肉眼直视下单人完成；供肺的获取较为快速，使用的套管更简单，套管技术趋于简 化，肺移植时血管套接技术成功率高，整体手术时间操作缩短。该模型复制出移植肺缺 血再灌注损伤的变化，是适合肺移植缺血再灌注损伤研究的理想模型。 第二部分 骨髓间充质干细胞的分离、培养、鉴定、标记及其对大鼠 移植肺缺血再灌注损伤的保护作用 肺移植物缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法以SD大鼠为供受体，采 用改良袖套法技术建立同种异体左肺移植模型。设立假手术组(A组)、I／R组(B组)和 植，移植肺再灌注4h后，阻断右肺门，测量气道压力，动脉血PaO：、PaCO。。随后处死 法检测移植肺细胞凋亡水平。结果与假手术组相比，I／R组气道压力升高、Pa02下降、 于假手术组确实造成了明显的缺血再灌注损伤；与I／R组相比，BMSCs组气道压力降低、 显减轻，炎症细胞浸润减少，肺泡腔内水肿液和红细胞少见；免疫组化TNF-a表达减 植肺的缺血一再灌注损伤。(2)BMSCs通过其抗氧化、抗炎、抗凋亡和旁分泌效应等抗损 伤、促组织修复等多种途径明显减轻移植肺缺血再灌注损伤，提高肺移植术后早期肺功 能。因此BMSCs移植可成为预防和减轻肺移植术后缺血再灌注损伤的一种有益尝试。 第三部分 缺血后适应基础上骨髓间充质干细胞移植对大鼠 移植肺缺血再灌注损伤的保护作用 血再灌注损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法以SD大鼠为供受体，采用改良三袖 注，灌注后行左肺原位移植，移植肺再灌注4h和72h后，分别随机抽取大鼠7只阻断 右肺门，测量气道压力，动脉血PaO：、PaCO。。随后处死大鼠测定：肺W／D比率、肺组 凋亡水平。免疫荧光法检测肺组织中BMSCs的定位情况。结果基因和蛋白水平检测显 4 肺泡腔内水肿和渗出改变减轻最明显。免疫荧光法检测72h取的肺组织，BMSCs在肺组 IRI、提高肺移植术后早期肺功能的机制与其抗氧化、抗炎、抗凋亡、旁分泌效应和干 成为预防和减轻同种异体肺移植物IRI的一种全新的策略。 【关键词】 骨髓间充质干细胞；缺血后适应；同种异体肺移植；缺血再灌注损伤； 旁分泌；归巢；凋亡 Marrow ProtectiveEffects ofBone Stromal byTransplantations Brought StemCellsBasedonIschemic Ischemia· Postconditioningupon of inRats reperfusionInjuryPulmonaryAllog