ghrelin对脓毒症小鼠肺脏炎症及其JAK%2fSTAT(信号转导和转录激活子)通路的影响.pdfVIP

Ghre (信号转导和 1．n对脓毒症小鼠肺脏炎症及JAK／STAT 转录激活子)通路的影响 Ii8t111 Yil112llllll6LIlltoillIl2UlIl3IlUIIoLI 摘 要 目的： 通过观察生长素释放肽(ghrelin)对腹腔内注射内毒素 制作脓毒症小鼠模型肺组织炎症反应的严重程度、肺组织janus激酶／ 毒症炎症反应中的调节作用，进一步阐明脓毒症的发病机制以及探讨 ghrelin在调节脓毒症炎反应的作用机理，为提高脓毒症治愈率寻找新 的思路。方法：1、通过经典脓毒症制作模型即腹腔注射内毒素(LPS) 建立脓毒血症模型，采用腹腔注射外源性生长素释放肽 (ghrelin200ug／kg)进行干预，腹腔注射等量生理盐水作为对照。 选取雌性昆明小鼠54只，体重20—259，随机分为3组：对照组、模 射入等量生理盐水；B(模型组)处理：经腹腔内注射入脂多糖6mg／kg； c(干预组)：先经腹腔注射入ghrelin200ug／kg，30分钟后再经腹 腔注射入脂多糖6mg／kg；2、各组分别于3小时、9小时及18小时随 机处死小鼠各6只，留取标本行相应检测：①取各实验组右肺上叶组 织，用于HE染色，光镜下观察肺组织病理变化。 ②左肺上叶用于 stat3蛋白表达水平。③RT-PCR法检查双肺下叶肺组织stat3mRNA 1 的基因表达。3、所得数据以均数+标准差来表达，统计分析使用 SPSSl7软件。用单因素方差分析来比较组之间总体差异，用SNK方 关分析。结果：1、对照组小鼠肺组织HE染色光镜下肺组织结构完 整，气道上皮细胞排列整齐，未见明显炎症细胞浸入，间质无水肿， 无出血，无水肿液、肺泡腔完整；而模型组各时相见肺问质水肿，肺 泡内有大量炎性细胞浸润，部分可并扩散到邻居肺泡中，部分上皮细 胞变形脱落，毛细血管扩张淤血，间质及肺泡内出血明显，部分可见 渗出物破坏肺泡结构，同时肺泡隔水肿、增厚，渗出液浸入肺泡腔内， 腔内充满红细胞，局灶有肺泡膨胀不全或肺泡塌陷、融合，出现典型 的脓毒血症病理改变，在造模后3小时即可见典型炎症渗出病变，尤 以造模后9小时炎症反应最为严重，l8小时还可见肺泡腔纤维素渗 出，呈增生样改变； Ghrelin干预组肺组织病理炎症改变在各时间点 均较模型组减轻。2、模型组和干预组中肺组织匀浆stat3mRNA的表 达在各时间点较对照组相比均显著增加，差异具有统计学意义(尸值 型组均有所下降，差异有统计学意义(P值均0．001)。3、模型组及 干预组肺组织匀浆中STAT3的蛋白表达在各时相与对照组比较均升 的蛋白表达在各时间点较模型组均有所下降，差异有统计学意义(P 及干预组肺组织匀浆在早期就出现炎性细胞因子TNF．a和IL．6的 升高，同肺组织匀浆stat3的蛋白表达的升高在时间上存在一致性， 仍以9小时升高最为明显，与对照组比较存在统计学差异(尸值均 中均较模型组下降，差异有统计学意义(尸值均0．001)，相关分析 有相关性，均成正相关，相关系数为分别为0．88、0．9l。干预组中star3 的蛋白表达与TNF。a和IL一6在肺组织中的表达同样具有相关性， 均成正相关，相关系数为分别为0．88、0．88。结论：腹腔注射内毒素 可以成功复制脓毒症小鼠模型，在复制模型后3小时即可见较重的炎 症反应，最重的时期在9小时，脓毒血症后期开始出现纤维增殖，纤 hreli 维素形成。给予外源性g n干预可改善脓毒血症小鼠肺脏炎症 细胞浸润、同时肺组织转录激活因子STAT3mRNA基因及STAT3蛋 白表达水平均同步下降，并伴有炎性细胞因子(TNF．Q和IL．6)表达 降低，ghrelin参与了脓毒症炎症级联放大反应的调节作用，其调节炎 通路、下调炎性细胞因子(TNF．0【和IL．6)的表达有关。 NF—a、I 关键词：ghrelin；脓毒症；jak／stat；TL一6；stat3