猫爪草有效部位和质量控制研究.pdf

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2005级硕士研究生 摘要 猫爪草有效部位和质量控制的研究 摘 要 中药有效成分群辨识技术的研究是中医药研究的关键技术之一,本论文以临 床具有显著疗效但尚未进行系统研究的中药材猫爪草为研究对象,对有效成分群 的辨识方法及功效相关性进行了探索性研究。 Ranunculi 猫爪草Radix tefAatus Thun良的块根,性甘、辛,微温,具有清热解毒、消肿散结的功效, 临床研究表明,猫爪草及其制剂对肺结核、淋巴结核和多种癌症及淋巴瘤具有显 著疗效。现代药理研究表明,猫爪草水提液不仅对金黄色葡萄球菌、绿脓杆茵等 细菌有抑制作用,对S-180肿瘤株有显著抑制作用。 论文以化合物类别为试验单位,以结核杆菌药敏试验和细胞毒试验为药效指 标,筛选了有效部位,并应用HPLC-MS“技术进行了谱效相关性和化合物辨识方法 的探索性研究,进行了有效部位成分的分离和药材质量控制的研究。 论文由文献综述和实验两部分组成。 第一部分文献综述 通过对报道文献资料的研究,对猫爪草的植物来源和商品用药、资源分布、 化学成分、质量控制、药理活性、功效主治及临床应用等方面的研究进行了较为 系统的综述。 第二部分实验部分 一、有效部位的研究 1.论文采用树脂分离结合溶剂萃取的方法,以化合物类别为分离单位,提取分 离了进行药效试验的物质,并结合结核杆菌药敏试验和细胞毒试验,进行了有效 部位筛选试验。 2.应用HPLC-MS技术首次对猫爪草有效部位进行了谱效相关性研究;并应用 HPLC-Ms/MS技术首次对有效部位的化学成分进行了辨识方法的探索;检索了有 效部位31个化学成分可能的化学式,并利用HPLc州s/Ms的碎片离子的精确质量 数,推测了裂解方式,根据碎片信息,推测了19个可能的化合物,并用对照品 验证了丁二酸、辛二酸、壬二酸、癸二酸、咖啡酸等化学成分。 3.首次通过对MS/US失去碎片信息的分析,统计结果显示有效部位中有多种有 机酸存在,并可分为四类:一为芳香酸及其糖苷,二为脂肪二元酸及其糖苷,三 为羟基羧酸及其糖苷,四为杂环羧酸及其糖苷,其化合物辨识及验证尚有待进一 步探索。 2005级硕士研究生 摘要 4.利用C18、硅胶、葡聚糖凝胶(LH-20)等层析分离技术及制备液相等手段对有 效部位进行了分离,得化合物有:辛二酸,壬二酸、癸二酸、咖啡酸、香草酸、 D一谷甾醇。其中辛二酸、壬二酸、癸二酸、咖啡酸、香草酸为本论文首次从猫 爪草中分离得到。 二、药材质量控制研究 根据现行版《中国药典》药材质量标准的条款及目前该药材的药典标准,论 文在鉴别、检查和含量测定项进行了研究,并起草了药材质量标准修订草案。研 究内容包括以下4个方面: 1.鉴别项,研究制定了药材的薄层鉴别方法;同时论文首次研究了应用傅立叶 变换红外分光光度法对猫爪草药材进行鉴别的方法,并探索了应用红外分光光度 法进行药材鉴别的参数设置。 2.检查项,对IO批次药材的水分、灰分、酸不溶性灰分、重金属和浸出物含量 进行了测定,为修订质量标准提供了参考依据。 3.含量测定项,结合药效试验,选择了总游离酸、总黄酮为分析对象,进行了 猫瓜草中总游离酸和总黄酮含量测定方法的研究。 (1)首次建立了应用电位返滴定法,直接测定药材中总酸含量的方法,该方法 操作简便、结果可信,重复性好,方法学考察结果表明:符合含量测定的要求。 (2)应用差示分光光度法的原理,以碱性供试品溶液为参比,建立了中药材猫 爪草中总黄酮含量的测定方法。方法操作简便,结果可信,重现性好,方法学考 察结果表明:方法符合含量测定要求。 4.论文首次起草了比较完整的中药材猫爪草的质量标准修订草案,为药典标准 的修订提供了参考依据。 关键词:猫爪草;有效部位;HPLC-MS;质量控制 n 2005级硕士研究生 ABSTRACT STUDYSONTHEEFFECTIVE

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