中药黄芩活性成分分析方法的研究及其不同产地药材差异甄别.pdfVIP

摘 要 黄芩，作为传统中药，不但被广泛应用于多种中药复方制剂，也 被用作食品添加剂，在许多方面都显示较强的生物活性。目前，对于 黄芩的研究主要集中于黄芩根中的黄酮类化合物，有关其地上部分活 性物质的研究相对较少；同时相关文献报道，黄芩中也含有微量的有 机酸类化合物，显示强的活性，为其另一种有效成分。为了全面研究 黄芩中的活性成分，更准确地评价药材质量，本工作主要针对黄芩中 两类活性成分建立了三种分析方法；建立了不同产地黄芩地上部分和 地下部分的综合指纹谱库；此外，采用相似度评价和聚类分析对不同 产地药材进行了差异甄别，对黄芩的质量控制具有实际意义。 本文主要做了以下工作： 1．以HPLC—DAD联用分析技术为手段，建立了黄芩液相色谱指 纹分析方法。内容包括：(1)黄芩根、茎、叶中活性成分的提取方法 和液相色谱条件的优化以及方法学验证等，使建立的液相色谱指纹分 析方法具备特征性、稳定性、系统性及可靠性。(2)结合色谱保留及 紫外光谱数据特征，对最优条件下所得的黄芩根、茎、叶的指纹图谱 进行定性分析。(3)对30个不同产地的黄芩根和16个不同产地的黄芩 茎、叶中黄芩苷的含量进行分析。(4)对不同产地的黄芩进行指纹分 析，将所得指纹图谱分别导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A 版》进行谱峰匹配分析，最终成功建立了不同产地黄芩根、茎、叶的 综合指纹谱库。 2．以HPLC／ESI．MS分析技术为手段，建立了黄芩根、茎、叶中 微量酚酸类成分分析方法。内容包括：(1)黄芩根、茎、叶中有机酸 类成分的提取方法、液相色谱条件、质谱条件的优化以及方法学的考 察等，使建立的HPLC／ESI．MS分析方法具备灵敏度高，重复性、稳 定性好，准确度高的特性。(2)采用离子阱质谱仪对分离出的目标物 进行二级质谱裂解，根据母离子、二级质谱裂解特征及色谱保留实现 全定性，最终从黄芩根、茎、叶中定性出6种有机酸类化合物。(3) 对黄芩根、茎、叶中三种活性较高的有机酸进行了定量分析，并成功 应用于河北承德道地药材的分析。 3．以新型DCBI．MS分析技术为手段，建立了黄芩根中黄酮类 化合物的快速鉴定分析方法。内容包括：(】)考察不同的样品制备方 法、不同的质谱监测模式、不同的离子源解吸温度等重要因素对质谱 响应信号的影响，从而确定高通量、高灵敏度的DCBI．MS分析的最 佳条件。(2)采用离子阱质谱仪对分析出的目标物进行二级质谱裂解， 根据母离子和二级质谱裂解特征实现全定性分析：最终鉴定出12种 对比，实现优势互补；最终成功应用于11个不同产地黄芩药材的分 析。 4．基于液相色谱指纹图谱甄别不同产地黄芩药材成分差异的研 究。内容包括：(1)对不同产地的黄芩根、茎、叶进行指纹图谱分析， 选取相似度匹配较高批次(0．85)建立三类样品的共有模式，进行 指纹图谱比较。(2)采用SPSS统计学软件，对30个不同产地的黄 芩根指纹图谱进行聚类分析，进行黄芩产地鉴别。(3)采用SPSS统 计学软件，对16个不同产地的黄芩根．、茎、叶指纹图谱进行聚类分 析，建立黄芩综合指纹鉴别系统，甄别药材真伪、产地差别及其质量 评价。 关键词：黄芩、黄酮、有机酸、指纹图潜、t-LPLC—MS、DCBI—MS、 相似度、聚类分析 ABSTRACT Scutellariabaicalensis akindoftraditionalChinese Georgi(SBG)is hasbeen usedin medicine，which traditionalChinese widely prescriptions， andhasbeen usedasakindoffoodadditive．Itshowseffective biological in ofresearchsaboutSBGwere activitymanyaspects．Atpresent，most