第3章酶代谢.ppt

辅酶在催化反应过程中，直接参加了反应。 每一种辅酶都具有特殊的功能，可以特定地催化某一类型的反应。在反应中起运载体的作用，传递电子、质子或其它基团。 同一种辅酶可以和多种不同的酶蛋白结合形成不同的全酶。 一般来说，全酶中的辅酶决定了酶所催化的类型（反应专一性），而酶蛋白则决定了所催化的底物类型（底物专一性）。 1、结合部位（Binding site） 酶分子中与底物结合的部位或区域一般称为结合部位。 结合部位决定酶的专一性 酶分子中促使底物发生化学变化的部位称为催化部位 催化部位决定酶所催化反应的性质 1 Km 1 1 ??? = ?? ? ??? + ?? V Vmax [S] Vmax 酶只有与底物结合后才与抑制剂结合，从而导致酶活性下降。 四、pH对酶促反应速度的影响 在一定的pH下, 酶具有最大 的催化活性,通常称此pH为 最适pH。 过酸或过碱影响酶蛋白的 构象，使酶变性失活。 影响酶分子中某些基团的 解离状态（活性中心的基团 或维持构象的一些基团） 影响底物分子的解离状态 最适pH不是酶的特征常数，受E的纯度， 底物与缓冲液种类、浓度的影响。 最适温度 (optimum temperature)：酶促反应速度最快时的环境温度。它不是酶的特征性常数 温度升高，酶促反应速度加快。 温度升高,酶的高级结构将发生变化或变性，导致酶活性降低甚至丧失。 大多数酶都有一个最适温度。在最适温度条件下，反应速度最大。 最适T，不是酶的特征常数，它与酶作用时间的长短、底物种类以及PH有关。 五、 温度对酶促反应速度的影响 金属离子：K+、Na+、Mg2+、 Cu2+、 Mn2+ 、 Zn2+ 、 Se3+、Co2+、 Fe2+ 六、激活剂对酶促反应速度的影响 凡能提高酶活性的物质，都称为激活剂（activator） 类别 阴离子： Cl-、Br- 有机分子还原剂：抗坏血酸、半胱氨酸、谷胱甘肽、 金属螯合剂：EDTA 七、抑制剂对酶促反应速度的影响 失活作用：凡使酶蛋白变性而引起酶活力丧 失的作用。 抑制作用：使酶活力下降，但并不引起酶蛋白 变性的作用。此作用使一部分酶的必需基团 或辅助因子失活（活力变小）。 （一）不可逆抑制(irreversible inhibition) I与E共价结合，是一不可逆反应，二者结合后，不能透 析除去抑制剂，使酶永久失去活力，称为不可逆抑制作用 常见不可逆抑制剂：烷化剂、酰化剂、氧化剂、有机磷、 有机贡、氰化物、氮化物、重金属。 七、抑制剂对酶促反应速度的影响 解毒 -- -- -- 解磷定(PAM)： 例2 有机磷杀虫剂不可逆抑制羟基酶的活性中心 例1 碘乙酸、碘乙酰胺、对氯汞苯甲酸对巯基酶的不可逆抑制 E-SH+ICH2COOH→E-S-CH2COOH+HI （一）不可逆抑制(irreversible inhibition) 有机磷毒剂二异丙基氟磷酸酯 （二）可逆抑制(reversible inhibition) I与E非共价结合，为可逆反应，透析能除去抑制剂使酶恢 复活力，引起酶活性暂时性丧失，称为可逆抑制作用。 类型： 竞争性抑制 (competitive inhibition) 非竞争性抑制 (non-competitive I.） 反竞争性抑制 (uncompetitive I.) 七、抑制剂对酶促反应速度的影响 1、 竞争性抑制 抑制剂的化学结构与底物相似，因而能与底物竟争与酶活 性中心结合。当抑制剂与活性中心结合后，底物被排斥在 反应中心之外，其结果是酶促反应被抑制了。 （二）可逆抑制(reversible inhibition) 七、抑制剂对酶促反应速度的影响 + I EI E + S E + P ES 竞争性抑制通常可以 通过增大底物浓度， 即提高底物的竞争能 力来消除。 竞争性抑制反应模式 竞争性抑制的米氏方程 无抑制剂 竞争性抑制剂 1/v 1/s 1/Vmax Km 变大 Vmax不变 竞争性抑制举例 丙二酸与琥珀酸竞争琥珀酸脱氢酶 琥珀酸 琥珀酸脱氢酶 FAD FADH2 延胡索酸 琥珀酸 草酸 草酰乙酸 丙二酸 戊二酸 琥珀酸 延胡索酸 竞争性抑制举例 磺胺类药物的抑菌机制： 与对氨基苯甲酸竞争二氢叶酸合成酶 竞争性抑制举例 二氢蝶呤啶 ＋ 对氨基苯甲酸 ＋ 谷氨酸 二氢叶酸 合成酶 二氢叶酸 SO 2 NHR H 2 N 磺 胺 类 药 物 竞争性抑制的特点 I与S结构类似，竞争酶的活性中心，排斥性抑制 加大底物浓度可以消除抑制 动力学特点：Vmax不变，表观Km增大 曲线图：有I比无I曲线下移， 但最高点相同。 双倒数曲线图：有I比无I斜率增 大，并在纵轴交一点。