实验性癫痫动物脑线粒体功能的研究.pdfVIP

摘 要 线粒体是细胞内的动力室，它通过氧化磷酸化过程提供生命活动所需的大部 分能量。线粒体的变化是某些病理状况的重要影响因素，其可能是癫痫进一步发 生发展机制中有重要影响作用的环节之一。另外，线粒体作为唯一独立于染色体 外的遗传系统已日益受到关注。本实验室自制了线粒体翻译过程中两个延长因子 mtTu、mtTs的抗体。目前，对癫痫发作过程中，线粒体的变化的了解还很少， 对mtTu、mtTs的研究也多在其结构及肿瘤病理中。为此我们作了以下两部分工 作。 1．线粒体的呼吸功能和呼吸酶功能的测定。 在建立慢性癫痫大鼠模型的基础上，采用计算机氧气测量系统测量脑线粒体 的耗氧量，计算呼吸功能和呼吸酶功能的相关参数。时实验大鼠随机分4组：正 常组，慢性模型未点燃组，慢性点燃模型癫痫发作组，慢性点燃模型癫痫不发作 组。 结果： ①在大鼠海马和皮质的线粒体，以NAD+作为氢接受体的I、III、Ⅳ复合体组成 的呼吸链，点燃后的呼吸控制率较正常组明显下降f皮质P001，海马P0 05)， 纹状体没有明显降低；在皮质，海马及纹状体，由FAD作为氢接受体的II、III、 IV复合体组成的呼吸链的呼吸控制率没有表现出明显的降低。未点燃的模型中两 条呼吸链的呼吸控制率与正常组相比均无明显差异。 ②在皮质、海马、纹状体点燃后与点燃前正常组相比，线粒体琥珀酸脱氢酶的功 能均有明显升高(PO 05)。 在皮质和海马NADH脱氢酶，点燃后与正常组相比有明显升高fPo 01)，而纹状 体线粒体的该酶功能仅在癫痫发作组较正常组有明显的升高(Po 05)。 在皮质和海马细胞色素C氧化酶的功能，在癫痫发作组较正常组有明显升高 (P005)，在纹状体，各组间无明显差异。吱 2．线粒体翻译延长因子mtTu、mtTs表达的变化。 实验大鼠随机分5组：正常组、癫痫发作后半小时、l小时、4小时、48小 时组，在癫痫持续状态的大鼠模型中，采用免疫组织化学的ABC方法观察。 ／ ／结粜： ＼ f内表达随iJc ①仡海‰皮质中，癫痫发作后mtTu riiJ延氏|7ii增加，剑48小时义 柯所I?降，j川，拒癫痫发作后4小时mtTu的表达达到最高(PO0I)．48小时丧 达下降后在海马部位其与正常组相比无统计意义(PO 5 05)，。在大鼠纹状体中o 小时、4小时表达升高(PO 01)，到48小时又有所下降。 ②在大鼠海马、皮质中mtTs的表达，在癫痫发作后o5小时、1小时、4小时随 时间延长而增加，在癫痫发作后4小时达到最高(PO 001)，到48小时又有所下 降。纹状体中则一直呈上升趋势。j ／ 关键词：癫痫持续状态i癫痫点燃模型，线粒体功能，线粒体酶功能，线粒体翻． 译延长因子Tu j线粒体翻译延长因子Is： 4 Abstract Mitochondriathe is ofthe the forlife cell，which