牡丹开花调控转录因子基因PsCOL4的克隆、表达与系统进化分析.doc

园 艺 学 报 2014，41（7）：1409–1417 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 收稿日期：2013–12–23；修回日期：2014–06–13 基金项目：中国农业科学院院所基金项目（2060302-2-12）；国家‘863’计划项目（2011A；国家公益性行业（农业）科研 专项（201203071）；中国农业科学院科技创新工程项目（2013-2014）；农业部园艺作物生物学与种质创制重点实验室项目 * 通信作者 Author for correspondence（E-mail：zhxiuxin@163.com） 牡丹开花调控转录因子基因 PsCOL4 的克隆、表 达与系统进化分析 王顺利，薛璟祺，朱富勇，张 萍，任秀霞，刘传娇，张秀新* （中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京 100081） 摘 要：采用RT-PCR方法从‘紫罗兰’牡丹（ Paeonia suffruticosa ‘Ziluolan’）花芽中克隆得到1 个重要开花调控转录因子基因 CONSTANS-like ，其cDNA全长1 125 bp，编码373个氨基酸。序列比对和 结构域分析表明，此蛋白包含两个B-box型锌指结构和1个CCT结构域，与拟南芥的AtCOL4最为相似， 将其命名为 PsCOL4 ，GenBank登录号为KF113358。系统进化树分析表明，PsCOL4与葡萄编码的VvCOL4 的亲缘关系最近，属于第1群组CO类似基因。实时定量PCR表明， PsCOL4 在不同组织器官中均有表 达，其中茎和叶中的表达量最高，根中最低。在花芽不同发育时期， PsCOL4 的表达呈现递减趋势。不同 光周期条件下， PsCOL4 的表达稍有不同，短日照条件下在叶中的表达有所增加，茎中稍有减少。 关键词：牡丹；光周期途径； CONSTANS 基因； PsCOL4 ；实时定量PCR 中图分类号：S 685.11 文献标志码：A 文章编号：0513-353X（2014）07-1409-09 Molecular Cloning，Expression and Evolutionary Analysis of the Flowering- regulating Transcription Factor Gene PsCOL4 in Tree Peony WANG Shun-li，XUE Jing-qi，ZHU Fu-yong，ZHANG Ping，REN Xiu-xia，Liu Chuan-jiao，and ZHANG Xiu-xin* （ Institute of Vegetables and Flowers ， Chinese Academy of Agricultural Sciences ， Beijing 100081， China ） Abstract：One important flowering-regulating transcription factor gene CONSTANS （ CO ）was obtained from tree peony（ Paeonia suffruticosa ‘Ziluolan’）by RT-PCR. The full cDNA length of PsCOL4 was 1 125 bp，and could encode 373 amino acids. Sequence alignment and motif analysis showed that the deduced amino acids contained 2 B-box zinc figure motifs near the amino terminus and 1 conserved CCT domain near the carboxy terminus. It was designated as PsCOL4 and the GenBank accession was KF113358，according to its high identity of AtCOL4 in Arabidopsis . Phylogenetic analysis showed that it has close relat