麦芽根发酵生产碱性木聚糖酶.pdfVIP

陕西农业科学2015，61(10)：9—12，26 ShaanxiJournalofAgriculturalSciences 麦芽根发酵生产碱性木聚糖酶 孙晓宇 ，问清江 ，慕 娟 ，党 永 ，颜阳欣 ，胡世浩 。贺聪莹 (1．陕西省微生物研究所，陕西 西安 710043；2．长安大学 环境科学与工程学院，陕西 西安 710064； 3．西北大学 生命科学院，陕西 西安 71oo68) 摘 要：目的：BaciEuspumilusM一26以麦芽根为碳源发酵生产碱性木聚糖酶。方法：以单一麦芽根和复合麦芽 根分别为碳源 ，首先确定碳源组成及浓度 、氮源组成及浓度 、无机盐种类及浓度 ，然后通过正交试验得 出摇瓶发 酵的培养基配方，最后进行20L发酵罐发酵生产碱性木聚糖酶工艺条件研究。结果：碳源：麦芽根，麦芽根 ：麸 皮=7：3，5％和8％，氮源：牛肉膏和氯化铵；无机盐：氯化钠、氯化钙及硫酸镁。摇瓶发酵条件，37℃，220r· h～，48h，发酵罐发酵条件 ，37℃，24h。单一碳源发酵培养基，麦芽根5％，MgSO0．01％ ，氯化钠5mmo]·L～， 氯化钙 1mmol·L～，氯化铵 1．2％，牛肉膏 1．2％，K2HPO 0．4％，pH8．0；复合碳源发酵培养基，麦芽根麸皮 7％，MgSO40．03％ ，氯化钠 1mmo]·L～，氯化钙 5mmol·L～，氯化铵 1．0％，牛 肉膏 1．2％，K2HPO40．4％， pit8．0。摇瓶发酵最高产酶活力分别为268．38IU ·mL 和363．13IU ·mL～，发酵罐发酵最高产酶活力分别为 748．58IU ·mL 和1348．99IU ·mL～。结论 ：麦芽根与麸皮组成复合碳源经 BacilluspumilusM一26发酵生产 碱性木聚糖酶，摇瓶产酶活力363．13IU ·mL～，发酵罐产酶活力 1348．99IU ·mL～。 关键词 ：麦芽根 ；发酵 ；碱性木聚糖酶 麦芽根为啤酒工业中麦芽生产中的副产物， 他试剂为市售分析纯。 富含粗纤维和蛋 白质 。一般作为饲料直接利用， 1．1．4 仪器 GL一20M冷冻离心机 (上海)；752 还对其中的蛋白质类物质核酸酶、磷酸单酯酶及 紫外分光光度计；722分光光度计；LGJ一冷冻干 磷酸二酯酶进行了提取和应用 J。麦芽根 中的 燥机 (河南)；GUJS一20L发酵罐 (镇江东方生物 半纤维素主要成分 一木聚糖可以作为株短小芽胞 工程设备技术有限公司)；DL一6M大容量低速冷 杆菌的碳源发酵生产碱性木聚糖酶，可以增加麦 冻离心机(长沙湘仪离心机仪器公司)。 芽根的附加值，提高经济效益。高产碱性木聚糖 1．1．5 种子培养基 (g ·L ) 蛋 白胨 10g，酵 酶菌株一短小芽胞杆菌M一26，是木聚糖依赖性 母膏5g，氯化钠 10g，pH8．0； 产酶菌株，只有以木聚糖为主要碳源时才能分泌 基础产酶培养基 (g ·L )：碳源40g，Mg— 产生碱性木聚糖酶 。本文应用 已有的碱性木聚糖 SO4 ·7H200．1g，K2HPO44g ，pH8．0。 酶产酶菌株短小芽胞杆菌 M一26 ’为研究对 1．2 方法 象，利用麦芽根为发酵碳源进行发酵和碱性木聚 1．2．1 碳源(麦芽根单一碳源和复合碳源)浓度 糖酶制备工艺条件研究，研究探索麦芽根发酵生 对菌株产酶的影响 保持基础产酶培养基 中其它 产碱性木聚糖酶 。 成分不变，分别 以4％麸皮和麦芽根为碳源， 37 、220r·min 振荡培养48h，测定发酵液的 1 材料与方法 酶活力，将两种碳源进行 比较 ；碳源4％，麦芽根 1．1 材料