利用炮制手段去除青木香中马兜铃酸的分析研究.pdfVIP

利用炮制手段去除青水香中马兜铃陵的研究 摘爱 摘要 马兜铃酸广泛存在于马兜铃属、细辛属植物中，是一种已知的肾毒素，能 够导致肾问质纤维化，也是一种潜在的致癌物质，啮齿类动物艮期服用时可导 致淋巴癌、肾癌、肝癌、胃癌等。正是由于这些毒性的存在，使得马兜铃属、 细辛属植物在临床中的应用受到了限制。因此我们提出了利用炮制方法来去除 马兜铃酸类毒性成分的T艺，从而达到“减毒存效”的目的。 此炮制工艺以马兜铃酸类成分中大量存在的毒性成分马兜铃酸A (Arist010chic acidA，AA)作为含量测定指标，借鉴传统炮制_1二艺的去毒经 验，对工艺进行了优化，确立了最终的炮制方法，并使此方法可应用到其它同 类药材的炮制中。 我们已经以青术香药材为研究对象，列此炮制工艺进行了规范化研究。在 减毒研究中，首先建立了青木香药材中的主要毒性成分AA的含量测定方法， 其含量足关木通药材中的1／3左右。然后采用正交实验和单因素循环的方法分 别对碱泡条件、醋制方法和醋制条件进行了考察，初步确定了青术香药材的最 佳炮制工艺。经三批中试研究的验证，经此炮制工艺处理后，青木香中AA的 去除率达到81％以上。急性毒性实验结果表明，青木香药材经炮制后LD50较 生品增加了约5_8倍。长期毒性实验结果也表明，青木香药材经炮制后降低原 药材对肝脏、‘肾脏和胃的毒性。通过以上的研究，证明此炮制工艺对青木香药 材确实达到了减毒的目的。 存效研究中根据青木香药材的临床功效，选取解痉、镇痛、抗炎三项药效 指标，对青木香的生品及炮制品的药效作用进行了考察。结果表明：青木香炮 制品保留了原药材的功效。 综上，我们已经从化学、分析、药效及毒理角度对炮制工艺的减毒存效目 标进行了论证，证明此炮制工艺对青木香药材达到了“减毒存效”的目的，是合 理的。 本论文继续以青木香作为研究对象，首先从本草考证、混淆品种、理化鉴 别、化学成分与含量、传统炮制情况、药理研究、临床应用、毒副作用等方面 的研究情况做了概述，总结了目前国内外对青木香研究的实际状况。 对青木香的炮制工艺进行了优化，以实现饮片中AA的残留在10ppm以下。 研究中测定了不同碱泡时间AA的含量，用原来的碱制方法(碱泡一淋洗-碱泡)， 第六天AA去除率只能达到95_87％，经改进方法后，即增加用清水浸泡过程， 年4用炮制手段去除青木香中马兜铃酸的研究 摘耍 使AA去除率达到了99．38％，说明用清水浸泡的过程更有利于AA的去除， 碱泡的时间越长AA的去除率越高，而且增加这一过程也有利于去除在碱泡过 程中引入的钠离子。按青木香炮制方法(北京市中药炮制规范，1986年版，北 京市卫生局，54)AA的去除率只有24％。 对优化的炮制工艺从钠离子的含量、生品与制品的LC．Ms分析、炮制前 后其中马兜铃总酸的含量等方面加以评价。 为了考察生品与制品在炮制前后在化学成分上有何不同，我们对生品和制 品进行了Lc．Ms对比研究，指认了生品中的4个色谱峰，分别为马兜铃内酰 胺N～B—D一葡萄糖苷，马兜铃酸c，7一羟基马兜铃酸A，马兜铃酸B；制 品的HPLc图．卜剩余的四个主要成分，从他们的紫外吸收上看不是马兜铃酸类 成分，马兜铃酸类成分基本检测不到。 为了考察马兜铃酸类成分的总体分布以及去除情况，我们建立了含有马兜 铃酸类中药材的总马兜铃酸的含量测定方法。青木香(江苏扬州)生品和炮制 品的总酸含量分别为O．543％和O．120％，同时测定了不同地区市售青木香中 ％)，重庆含量最低(O．145％)；其他8种含马兜铃酸类中药材中马兜铃总酸 含量(O．1 量最低(0．178％)。 质量标准研究从来源、制法、性状、鉴别、检查、含量测定等方面进行了 相关研究，并制定了炮制品的质景标准草案。 中药多以复方用药，冠心苏合丸是临床常用方，应用较广泛，在家庭用药 中常代替硝酸甘油使用，因此我们以此方为例，建立了其中马兜铃酸A的含量 测定方法，并测定了不同生产企渡产品的AA的含量，其中以北京同仁堂股份 有限公司同仁堂制药厂生产的滴丸中的AA含量最低(O．148mg·g。)；以三九企 业集团惠州阳光药业有限公司生产的胶囊中含量最高(O．516mg·g。)。2004年， 药监局禁It了青木香的使用，成方中的