第二十章生物大分子氨基酸和蛋白质临床精品.pptVIP

甘氨酸（pI=5.97）调节溶液的pH值等于5.97，再进行电泳，其在电场中的移动方向为（ ） A．移向电场阳极 B．移向电场 C．不移动 D．以上答案都不对 蛋白质沉淀的四种方法中，长时间作用时，（ ）方法能恢复原有的生物活性，是可逆的过程。 A．盐析 B．有机溶剂法 C．重金属盐沉淀蛋白质 D．某些酸沉淀蛋白质 Protein 二）蛋白质的胶体性质 蛋白质是高分子化合物，其分子颗粒的直径在1?100nm之间，属于胶体分散系，因此蛋白质具有胶体溶液的特性。如丁达尔效应、布朗运动和电泳现象且不能透过半透膜。蛋白质能形成较稳定的亲水胶体，其主要原因是：带电荷和水化膜 。 1、蛋白质的变性 ( denaturation ) 概念 蛋白质在某些物理、化学因素的作用下，其特定的空间结构被破坏而导致其理化性质改变及生物活性丧失的现象。 实质 破坏副键，改变空间结构，不涉及一级结构的改变。 三）蛋白质的变性与沉淀 Protein 加热、加压、超声波、紫外线、干燥脱水、剧烈的搅拌和振荡等。 强酸、强碱、有机溶剂、表面活性剂SDS、 胍、脲、重金属离子、生物碱试剂等。 变性因素 物理因素 化学因素 Protein （1）可逆变性：结构改变不大，可恢复原有的空间结构和生物学活性。例：晶体胃蛋白酶的变性与复性。 Protein （2）不可逆变性：结构改变较大，不易恢复原有的结构和生物学活性。绝大多数变性是不可逆的。 依据空间结构的破坏程度，变性可分为： 应用 消毒灭菌、临床化验 低温保存生物制剂 2、蛋白质的沉淀 ( precipitation ) 概念 分散在溶液中的蛋白质分子发生凝聚,并从溶液中沉淀析出的现象。 稳定因素： ①带电荷 ②水化膜 protein Protein + + + + + + + 带正电荷（亲水） － － － － － － － － 带负电荷（亲水） 等电点（亲水） 水化膜 + + + + + + + + 带正电荷（疏水） 沉淀 酸 碱 酸 碱 酸 碱 脱水作用 脱水作用 脱水作用 溶液中蛋白质的聚沉 － － － － － － － － 带负电荷（疏水） Protein 沉淀蛋白质的常用方法 盐析 有机溶剂沉淀法 重金属盐沉淀法 某些酸类沉淀法 Protein 概念 在蛋白质溶液中加入高浓度的中性盐如(NH4)2SO4、Na2SO4、NaCl等，破坏其水化层和中和表面电荷，使其沉淀析出的现象。 盐析浓度 蛋白质析出时所需盐的最小浓度。 分段盐析 利用不同的蛋白质盐析时所需盐的浓度不同，而将它们分离的方法。 （1）盐析 ( salting out ) Protein 特点 盐析法沉淀的蛋白质没有变性，去盐后活性恢复。 盐析示意图 Protein 概念 加入极性较大的有机溶剂甲醇、乙醇和丙酮等，能够破坏蛋白质的水化层，使蛋白质的溶解度降低而沉淀。 实质 破坏蛋白质水化膜。 特点 低浓度、低温、短时间内不变质。 （2）有机溶剂沉淀法 应用 中草药有效成分的提取中沉淀蛋白质. Protein 有机溶剂 Protein （3）重金属盐沉淀法 pHpI时 常见盐 HgCl2,AgNO3,Pb(Ac)2,CuSO4等。 特点 作用时间过久可引起蛋白质变性。 Protein pHpI时 常见酸 钨酸、苦味酸、三氯乙酸等。 特点 作用时间过久可引起蛋白质变性。 （4）某些酸类沉淀法 应用 临床检验时除去血液中干扰蛋白质。 Protein A Medical Chemistry Xinxiang Medical University 主讲：王秀菊 TELAims 1、了解氨基酸的基本分类及α-氨基酸的结构特点 2、掌握氨基酸的化学性质 3、熟悉蛋白质的结构特点（一级结构和空间结构） 4、掌握蛋白质的理化性质 蛋白质是一类结构比较复杂的含氮有机化合物，是生物体内一切细胞的重要组成成分，是生命活动的物质基础。而氨基酸是蛋白质的基本组成单位。 Amino acid 氨基酸是一类分子中既含有氨基(-NH2或=NH)又含有羧基(-COOH)的复杂化合物。 19.1.1 氨基酸的结构 蛋白质完全水解后的20种氨基酸都属于α-氨基酸，因此α-氨基酸是构成蛋白质的基石。 Amino acid 营养必需氨基酸： 亮、缬、异、苯、蛋、色、苏、赖 亮姐：（请寄）一本淡色书来 α -氨基酸结构通常表示为