适配子识别技术在真菌毒素快速的分析中的应用.pdfVIP

第4 1 卷 分析化学 (FENXI HUAXUE )摇 评述与进展 第2 期 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2013 年2 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 297 ~306 藡蕥蕥蕥蕥蕥蕥蕥蕥藡蕥蕥 DOI:10.3724/ SP.J.1096.2013.20993 评述与进展 藡蕥蕥蕥蕥蕥蕥蕥蕥 藡 适配子识别技术在真菌毒素快速分析中的应用 1,2 1 * 1 ,3 2 2 杨锡辉 摇 孔维军摇 杨美华 摇 赵 明摇 欧阳臻 1 (中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所, 北京 100193 ) 2 (江苏大学 药学院, 镇江2 12013 ) 3 (中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所海南分所(海南省南药资源保护与开发重点实验室),万宁571533 ) 摘摇 要摇 适配子是近几年来通过指数富集配基的系统进化技术(SELEX )体外筛选得到的一类与目标分子高 特异性结合的寡聚核苷酸片段。 适配子作为一个优于抗体的新型识别分子,已在食品快速检验、环境检测、新 药研发、临床诊断和治疗以及毒理研究等领域展示了良好的应用前景。 本文阐述了适配子识别靶物质的结构 基础及其特性,归纳了目前已筛选出的真菌毒素适配子序列,总结了适配子在真菌毒素前处理,适配子光学分 析技术和电化学分析技术在单种和多种真菌毒素检测中的应用突破,并展望了适配子识别技术在真菌毒素 分析领域的发展趋势。 关键词摇 核酸适配子;真菌毒素;评述 1摇 引摇 言 适配子(Aptamer ),又称适体,是应用新型组合化学技术鄄指数富集配基的系统进化技术(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment, SELEX )体外筛选得到的一类由25 ~80 个碱基组成的寡 聚DNA 或RNA 分子。 其特殊而稳定的三维结构,可以通过空间构型互补高亲和力、高特异性与不同 靶物质结合,这种结合方式与抗体和抗原结合类似,但又有不同于抗体的特点,是一种特殊的“化学抗 体冶。 近年来,随着一些改良SELEX 体外筛选技术的不断出现和应用,如切换 SELEX ,加尾 SELEX 、 [1] CE鄄SELEX 、FluMag鄄SELEX 、微流体SELEX 等 ,使得适配子筛选效率大大提高,极大地拓展了适配子 [2] [3] [4,5] [6] [7] 技术在有害物质检测 、新药研发 、药物传递系统的设计 、生物成像 、临床治疗 等领域的应用空 [8 ~10] [11] [12] [13] 间。 其检测范围也由蛋白质、酶等大分子物质,扩展到毒素 、金属离子 、有机染料 、农药 等外 源性小分子污染物。 真菌毒素(Mycotoxins )是由真菌产生的毒性次级代谢产物,对人和动物的毒性主要有致癌、致畸、 致突变、中毒性肾损害、肝细胞毒性、免疫抑制和生殖紊乱等,给人和动物的健康带来了巨大隐患。 目 前,真菌毒素的污染研究备受关注。 真菌毒素虽然广泛存在于粮食谷物、啤酒、葡萄及葡萄酒、咖啡及可 可、调味料、中草药等多种农作物和食品中。 但由于其具有痕量(伊10-9 数量级)、剧毒、种类繁多、受污染 的基质比较复杂等特点,给实际检测带来了很大难度。 因此,寻找简单、快速、准确、经济、灵敏高、特异 性强的检测方法,对于研究真菌毒素的污染状况,制定各种基质中真菌毒素的限量标准具有重要意义。