第一章 基因工程概述精品.pptVIP

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三大发明 6 重组子导入受体细胞技术 1944年:肺炎链球菌被成功转化 1970年:大肠杆菌才被成功转化,得益于CaCl2 的应用 1973年,Stanford大学的Cohen等成功地利用体外重组实现了细菌间性状的转移。 1973年被定为基因工程诞生的元年。 基因工程诞生 Cohen等的重组实验示意图 Tcr Ner Eco RI Eco RI T4连接酶 Tcr Ner 双抗重组菌落 基因工程发展史上首次实现了重组DNA的细菌转化 pSC101质粒DNA R6-5质粒DNA 第二节 基因工程的研究内容 一 基因工程的概念 在分子水平上,提取或合成不同生物的遗传物质,在体外进行切割、再和某一载体进行拼接重组,然后再将重组的DNA导入宿主细胞内,最后实现目的基因稳定复制和表达的过程。 生物工程 biological engineering 遗传工程 genetic engineering 基因工程 gene engineering 分子克隆 molecular cloning 基因克隆 gene cloning 基因操作 gene manipulation 重组DNA技术 recombinant DNA technique 一 基因工程的概念 二 基因工程研究的基本步骤 1、从生物体中分离得到目的基因(或DNA片段) 2、在体外,将目的基因插入能自我复制的载体中得到重组DNA 分子。 3、将重组DNA分子导入受体细胞中,并进行繁殖。 4、选择得到含有重组DNA分子的细胞克隆,并进行大量繁殖, 从而使得目的基因得到扩增。 5、进一步对获得的目的基因进行研究和利用。比如, 序列分 析、表达载体构建、原核表达以及转基因研究和利用等。 三 基因工程的基本流程 基因分离酶切 载体酶切 基因和载体连接 导入细菌 重组质粒繁殖 重组克隆的选择 序列分析和基因表达等研究 导入植物细胞 第三节 基因工程的成就和研究进展 成就: 在医药领域 在农业领域 在工业领域 研究进展: 医药领域 1977年,激素抑制素的发酵生产成功。Itakara等,化学合成的激素抑制素基因和大肠杆菌?-半乳糖(苷)激酶基因插入到pBR322中得到重组质粒,并通过大肠杆菌生产出含有激素抑制素的嵌合型蛋白,经溴化氰处理后释放出了有生物活性的激素抑制素。首次实现了真核基因的原核表达。用价值几美元的9升培养液生产出50毫克的生物活性物质,这相当于50万头羊脑的提取量。 1978年: Goeddel等,人胰岛素的发酵生产成功。 1979年: Goeddel等,又在大肠杆菌中成功表达了人生长激 素基因。 1980年: Nagata等, 遗传工程菌生产干扰素获得成功。 1981年: 用遗传工程菌生产的生物制剂包括动物口蹄疫疫苗、 乙型肝炎病毒表面抗原及核心抗原、牛生长激素等。 1982年: 重组DNA技术生产的药物-人胰岛素进入商品化生产。 1983年: 基因工程生产狂犬病疫苗取得突破型进展。 我国基因工程部分研究进展 我国科学家将抗虫基因导入棉花,获得了抗虫植株,对棉蛉虫的抗虫效果十分显著。抗黄矮病、赤霉病、白粉病转基因小麦和抗青枯病马铃薯也已研究成功,开始田间加代繁殖。 转基因抗病虫植物 乙型肝炎是危害我国人民健康的严重疾病,我国乙肝病毒携带者1亿 1千万人,其中40%左右的慢性肝炎可能发展成为肝硬化和原发肝癌。以往乙肝疫苗是从人血清中提取,基因工程乙肝疫苗的研制成功,不仅有巨大的经济效益,而且有巨大的社会效益。基因工程乙肝疫苗是我国正式批准投放市场的第一种高技术疫苗,在20多项指标上达到国际先进水平,获国家科技进步一等奖。继乙肝疫苗之后,我国又研制成功了痢疾、霍乱等数种基因工程疫苗,并经国家批准进入临床试验。 基因工程疫苗 干扰素是一种广谱的抗病毒和抗肿瘤高技术药物,对防治病毒性肝炎和恶性肿瘤有重要的作用。现已有了3个品种的基因工程干扰素获得国家新药证书,开始大批量生产。除此之外,我 国还研制成功了肝癌导向药物(生物炸弹)、系列恶性肿瘤辅助治疗药物等十余种基因工程药物,有些已获试生产文号或进入中试开发阶段。 基因工程药物 转基因动物 生物工程 基因工程 细胞工程 酶工程 发酵工程 人类健康 农业 资源和能源 环境保护 基因工程 第一章 基因工程概述 第一节 基因工程的诞生和发展 第二节 基因工程的研究内容 第三节 基因工程的成就和前景展望 第一节 基因工程的诞生和发展 顺反子阶段 摩尔根

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