第一章基因工程概论精品.pptVIP

2011.7.10 山西农业大学 作为名词使用时，是指某一个体（或细胞、分子等）通过无性繁殖的方式产生的具有相同遗传背景的后代（或子细胞、分子等）组成的集体（或群体）；作为动词使用时，指产生上述集体或群体的过程。 所以，植物的无性繁殖（如马铃薯的生产）、细菌的无性繁殖以及重组DNA分子通过工程菌的繁殖等过程都是一个克隆的过程。 那么，克隆动物是怎么回事呢？ 基因工程的概念 一般来说，基因工程是在体外将目的DNA（来源可以是动植物和微生物）和某一载体（DNA）系统进行重组，再将重组的DNA导入宿主细胞内，最后实现目的基因稳定复制和表达的过程。 什么是克隆（Clone）？ 2011.7.10 山西农业大学 重要概念 基因工程（genetic engineering): 狭义上讲，基因工程是指将一种或多种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接，然后转入另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿遗传并表达出新的性状。又称DNA重组技术。 广义上讲，基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术两部分。上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建；而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。 2011.7.10 山西农业大学 第二节 基因工程的诞生 五、基因工程的特征 1、遗传信息随意传递性 2、无性扩增性 2011.7.10 山西农业大学 第三节 基因工程的研究内容 一、基础研究 1、目的基因 2、载体 3、受体系统 4、工具酶 5、新技术 二、应用研究 1、植物研究 2、动物研究 3、药物研究 4、食品、卫生、环境 三、安全性问题 2011.7.10 山西农业大学 第三节 基因工程的研究内容 四、基因工程操作的主要步骤 1、目的DNA片段的获得 2、重组体的制备 3、重组体的转化 4、重组子的筛选与增殖 5、克隆的鉴定 2011.7.10 山西农业大学 从生物体中分离得到目的基因（或DNA片段） 在体外，将目的基因插入能自我复制的载体中得到重组DNA分子。 将重组DNA分子导入受体细胞中，并进行繁殖。 选择得到含有重组DNA分子的细胞克隆，并进行大量繁殖，从而使得目的基因得到扩增。 进一步对获得的目的基因进行研究和利用。比如，序列分析、表达载体构建、原核表达以及转基因研究和利用等。 基因工程操作的基本步骤： 2011.7.10 山西农业大学 第三节 基因工程的研究内容 五、基因工程研究的技术路线 2011.7.10 山西农业大学 第三节 研究内容 重组DNA操作过程示意图 2011.7.10 山西农业大学 第四节 基因工程的应用 1977年，激素抑制素的发酵生产成功。Itakara等，化学合成的激素抑制素基因和大肠杆菌?-半乳糖（苷）激酶基因插入到PBR322中得到重组质粒，并通过大肠杆菌生产出含有激素抑制素的嵌合型蛋白，经溴化氰处理后释放出了有生物活性的激素抑制素。首次实现了真核基因的原核表达。用价值几美元的9升培养液生产出50毫克的生物活性物质，这相当于50万头羊脑的提取量。 1978年， Goeddel等，人胰岛素的发酵生产成功。 1979年， Goeddel等，又在大肠杆菌中成功表达了人生长激素基因。 1980年， Nagata等， 遗传工程菌生产干扰素获得成功。 1981年， 用遗传工程菌生产的生物制剂包括动物口蹄疫疫苗、乙型肝炎 病毒表面抗原及核心抗原、牛生长激素等。 1982年， 重组DNA技术生产的药物-人胰岛素进入商品化生产。 1983年， 基因工程生产狂犬病疫苗取得突破型进展。 2011.7.10 山西农业大学 1997年，动物基因工程产品销售额约 1.8亿$ 转基因小鼠 人类秃顶 Nature Biotechnology, 1999,17(1):9 转基因家蚕 防弹衣 Nature Biotechnology, 1999,17（5）：412 2011.7.10 山西农业大学 　　表皮干细胞能产生保护身体的外层皮肤，还有能产生头发和皮脂腺的毛囊。在衰老的皮肤中，一种叫做Smad7的蛋白质的生产过量，该蛋白会引发脱发和皮脂腺生长。???????研究人员构建出一种遗传改造小鼠，这种小鼠的皮肤（包括表皮干细胞）表达了与衰老皮肤类似的Smad7水平。他们发现Smad7的过度表达将表皮干细胞分化成像从形成毛囊转换到了皮脂腺，从而导致小鼠出现秃顶和油性皮肤。 人类的秃顶也随性别而不同,在男性中秃顶基因表现为显性,即BB和Bb都为秃顶;在女性中秃顶基因则表现为隐性,即Bb不为秃顶。 基因工程的应用 2011.7.10