菝葜提取工艺的进及药理学研究.pdfVIP

摘摘 要要 摘摘 要要 菝葜(Smilax china L)又名金刚藤 是百合科菝葜属的一种多年生落叶攀援灌木 药 用其根茎 目前临床上主要用于妇科盆腔炎等疾病的治疗 有较好疗效 目前的菝葜制剂主要为40% 乙醇提取物制成的糖浆 胶囊剂等 采用的仍是水煮 醇沉工艺 活性成分难以得到保证 有效成分较低 服用量大 同时对有效作用部位 及治疗盆腔炎等疾病的相关药理学没有进行过较系统全面的研究 影响了其在临床上 的进一步推广应用 本文通过膜分离技术对菝葜原有提取工艺进行改进 以两种黄酮和薯蓣皂苷为质量 控制指标 建立了 HPLC 含量测定方法 同时结合其主治病症盆腔炎 慢性盆腔炎等 疾病相关药理学模型 如抗炎 镇痛 免疫抑制 抗菌等 对其治疗及机理进行了探 讨 研究结果给菝葜的临床用药及进一步开发利用提供了理论及实验依据 本文完成 的主要工作如下 1. 改进了菝葜提取物制备工艺并对其中的薯蓣皂甙元 山柰酚和槲皮素进行了 HPLC 定量分析 通过膜分离技术对菝葜原有生产工艺进行了改进 并对其有效成分进行了测定 用 -1 纯甲醇为流动相在室温 25 和流速为 1ml·min 时测得薯蓣皂甙元的保留时间为 12.35min − − − 65:35:0.27:0.45 0.7ml·min-1 左右 用水 乙腈 磷酸 三乙胺 作为流动相 流速 和在室温 25 时测得山柰酚和槲皮素的保留时间分别为24.32min 和13.94min 左右 2 且薯蓣皂甙元和山柰酚主峰与相邻杂峰分离度均大于 达到了色谱分离的要求 槲皮 素主峰也与相邻杂峰获得了较好的分离效果 HPLC 分析表明水提醇沉提取物 膜分离 物和乙酸乙酯提取物中薯蓣皂苷元 槲皮素和山柰酚含量依次为0.0183% 0.0299%和 0.1446% 0.0102% 0.0164%和0.1836% 0.0076% 0.0093%和0.1232% 该方法精密 度和重现性均较好 同时表明了膜分离工艺代替传统工艺提纯金刚藤有效成分 去除 杂质是可行的 2. 菝葜不同提取物的抗炎作用研究 采用蛋清致足肿胀 甲醛致足肿胀 二甲苯致耳肿胀和醋酸致腹膜炎模型对菝葜 100g· /kg 不同提取物对急性 早期炎症的抗炎作用进行了研究 结果表明 在 生药 剂 量下 各提取物能显著降低蛋清诱导的大鼠足跖肿胀程度 活性大小依次为乙酸乙酯 提取物 膜分离物 水提物 此外 还能明显抑制甲醛诱导的小鼠足肿胀程度 小鼠腹 腔毛细血管通透性增高和二甲苯诱导的耳廓肿胀 活性依次为水提物 乙酸乙酯提取物 I 膜分离物 但三种提取物间差异并不显著 皮下植入琼脂致小鼠肉芽肿形成模型研究 结果也表明菝葜提取物对炎症晚期 慢性炎症 也有一定的抑制作用 活性大小依次 为乙酸乙酯提取物 膜分离物 水提物 通过大鼠血小板和腹腔巨噬细胞培养实验对菝葜的抗炎机理进行了探讨 研究了 (1 100 g·ml-1) sPLA NO TXB2 PGE2 / 菝葜不同提取物 − µ 对 2 活性 和 合成释放的影响 各提取物能明显抑制NO 的合成 释放及sPLA2