黄癸素联合用药的抗肿瘤疗效及其抗肿瘤转移与抑制仓鼠颊癌作用分析.pdf

黄癸素联合用药的抗肿瘤疗效及抗肿瘤转移和 抑制仓鼠颊癌作用的研究 中 文 摘 要 目的：本研究观察黄癸素联合用药的体内和体外抗肿瘤作用；黄癸素抗肿瘤 转移作用及其机制；黄癸素对化学诱导的仓鼠颊癌的防治作用。 方法：（1）应用MTT 法检测黄癸素联合临床常用药对体外培养肿瘤细胞增 殖的抑制作用。（2 ）应用小鼠移植性实体瘤H22 、S180 的治疗试验观察黄癸素 联合5-FU 的体内抗肿瘤活性。（3 ）通过琼脂糖凝胶电泳法测定黄癸素对SW480 细胞 DNA 拓扑异构酶活性的影响。（4 ）细胞-基质粘附实验检测黄癸素对 B16 细胞粘附能力的影响。（5 ）划痕实验检测黄癸素对B16 细胞迁移能力的影响。（6 ） 应用 Transwell 小室重建基底膜侵袭实验分析黄癸素对 B16 细胞趋化能力的影 响 。（7 ）免疫S-P 法测定黄癸素对肿瘤细胞转移相关因子CD44V6 表达的影响。 （8 ）明胶酶谱法测定黄癸素对肿瘤细胞分泌基质金属酶MMP-2 、MMP-9 表达 和活性的影响。（9 ）黄癸素对B16 细胞C57BL/6 小鼠实验性肺转移的影响。（10） 黄癸素对H22 细胞小鼠实验性肺转移的影响。（11）建立DMBA 诱导的仓鼠颊 囊癌变的动物模型，于6 周、9 周和 12 周系统观察黄癸素治疗组和对照组的局 部病变情况，实验结束进行病理学检查。 结果： 一、黄癸素联合用药的抗肿瘤疗效及相关机制 黄癸素联用羟喜树碱对SGC-7901、SW116、HepG2 、SW480 细胞具有显著 的协同抑制作用，与5-FU 联用对MGC-803 、SGC-7901、SW116 细胞具有协同 抑制作用；与5-FU 合用可显著抑制小鼠H22 、S180 实体瘤的在体生长；黄癸素 对拓扑异构酶都Ⅰ、Ⅱ的活性均有抑制作用。 二、黄癸素抗肿瘤转移作用及其机制初探 黄癸素可抑制B16 细胞与基质及内皮细胞的粘附，抑制作用呈浓度依赖性。 划痕实验中，在原始致伤区的基础上，用药组细胞在Fn 上的迁移均受到明显抑 制。Transwell 小室，药物与细胞作用48h 后，细胞穿越基底膜的能力显著低于 1 对照组，细胞侵袭数与药物浓度成反比。通过黄癸素作用的肿瘤细胞培养上清所 表达的MMP-2 、MMP-9 活性较对照组有显著的降低。在体试验显示黄癸素有一 定程度抑制C57BL/6 小鼠黑色素瘤肺转移、小鼠H22 肝癌肺转移的作用。 三、黄癸素对化学诱导仓鼠颊癌的抑制作用 黄癸素36、54、72mg/kg 分别作用于DMBA 诱导的仓鼠，第9 周开始高剂 量即有抑制病变发生的作用，第12 周病理检查见其颊粘膜的不典型增生发生率、 鳞癌发生率均有不同程度降低，54、72mg/kg 组仓鼠颊粘膜的不良增生总发生率 分别为66.6%、53.3%，比模型组（86.6% ）分别降低了20%和33.3% 。 结论：黄癸素与 5-FU、羟喜树碱对体外培养的多种肿瘤细胞具有协同抑制 作用，可能与其对拓扑异构酶都Ⅰ、Ⅱ活性的抑制作用有关。在体试验表明黄癸 素与5-FU 合用可显著抑制小鼠H22 、S180 实体瘤的在体生长。细胞试验显示黄 癸素可降低B16 细胞的粘附、侵袭和迁移能力。在体试验显示黄癸素可抑制B16 黑色素肿瘤和H22 肝癌的肺转移。黄癸素对化学诱导仓鼠颊癌有抑制作用。 关键词：黄癸素 协同作用 拓扑异构酶 肿瘤转移 CD44V6 MMP 仓 鼠 颊癌模型 2 T h e s y n e r g i s t i c a n t i t u m o r e f f e c t s o f b e r b e r i n e α-hydroxyβ-decanoylethyl sulfonate with other chemotherapeutic drugs and its antimetastatic activity as well as the inhibition on