特色药源植物盾叶薯蓣遗传转化的研究.pdf

戤 摘要 盾叶薯蓣(Dioscorea zingiberensisC．H．Wright)是我国特有的多年生药用植物，其 根状茎中的薯蓣皂甙元是合成甾体激素类药物的重要材料。在薯蓣属中，野生盾叶薯 蓣的皂甙元含量最高，据报道最高达到16．15％。近年来，随着人们对薯蓣皂甙元的需 求量增多和过度开发利用，野生盾叶薯蓣资源紧缺。为解决这一现状，人们进行了多 种努力，但是人工栽培育种存在薯蓣皂甙元含量和产量降低，多倍体育种存在盾叶薯 蓣根状茎的产量及薯蓣皂甙元的含量不稳定等问题，而基因工程手段为盾叶薯蓣的品 种改良开辟了新的途径。 本文首先对盾叶薯蓣再生体系进行了研究，以改良MS为基本培养基，添加不同 浓度的激素(6-BA和NAA)组合，确定了适合无菌苗的腋芽萌发、愈伤组织诱导、 分化和生根培养基的最适激素浓度组合，愈伤组织分化率可达90％以上，并且90％以 上的再生苗能够跃出须根，炼苗移栽后成活率较高；研究了农卡I『：菌侵染浓度、时间， 共培养时间，筛选培养的潮霉素B浓度和时间，抗生素的添加浓度，利用含有rFCA— RRMl基因片段的根癌农杆菌EHAl05质粒，转化了盾叶薯蓣胚性愈伤组织；对盾叶薯 蓣胚性愈伤组织进行rFCA．RR