高糖环境对豚鼠膀胱ICC样细胞c-kit+mRNA及蛋白的表达影响.pdfVIP

摘 要 目的：观察体外高糖环境培养的豚鼠膀胱cajal 样间质细胞c-kit 基因mRNA 及蛋白的表达变化，探 讨高糖环境对 cajal 样间质细胞及 SCF/c-kit 信号通路传导的影响，为下一步细胞功能学的逆转及恢 复细胞表型等研究提供前期证据。 方法：本实验应用胶原酶酶解法，培养出体外环境中高糖状态下的Cajal 样间质细胞，观察高糖环境 下豚鼠膀胱 Cajal 样间质细胞形态学变化，采用 RT-PCR 方法检测膀胱平滑肌组织不同高糖浓度下 Cajal 样间质细胞c-kit 基因mRNA 表达量的变化；采用激光扫描共聚焦显微镜测定c-kit 基因Cajal 样间质细胞蛋白的表达变化。 结果： RT-PCR 电泳结果经半定量分析显示高糖组培养的ICC样细胞C-kit mRNA转录明显较正对照 组及无糖组降低（P0.01 ），高糖组中15 mmol/L组及30 mmol/L组 c-kit mRNA转录无明显差异性 （P0.05 ），60 mmol/L组与15 mmol/L及30 mmol/L组比较可见c-kit mRNA转录明显降低；膀胱Cajal 样间质细胞c-kit蛋白阳性染色为绿色荧光，经波长为488 nm 的激光激发后观察显示15 mmol/L、30 mmol/