UV-A和UV-.pptVIP

ＵＶ－Ａ和ＵＶ－Ｂ提高甘蓝幼苗花青素含量以及调控基因表达分析 UV—A、UV—B UV是从太阳射向地球的紫外线光谱中的一部分，它的波长比可见光要短，所以肉眼是看不到的。根据波长的不同，UV可以分为UVA、UVB和UVC。其中UVA的波长最长，达到320-400纳米，UVB的波长是290-320纳米，而UVC则在到达地球之前就被臭氧层吸收了。没有被臭氧层吸收掉的UVA和UVB会照射到地球表面，给我们的肌肤带来伤害，让皮肤过早老化、给眼睛带来伤害，甚至造成皮肤癌。它们同时还能抑制免疫系统，弱化你抗击其他疾病的能力。 UV—A、UV—B UVA是生活紫外线，可透过窗户玻璃和云层射入人的肌肤，我们生命的大部分时间都是暴露在UVA光线之下的，他占据到达地球的所有UV光线的95%，虽然它没有UVB那么强烈，但是只要有阳光，它就会一直存在，并且保持均衡的强度，所以我们一年四季都应该注意防护UVA。 UV—A、UV—B UVB是户外紫外线，人们在室外活动时直接射入皮肤。它是皮肤变红、被晒黑的最主要原因，它主要伤害皮肤更为表层的部分，它也是皮肤出现黑斑、老化、导致皮肤癌的元凶。但是UVB的强度随着时间地点和季节在不断变化，UVB光线最强烈的时间是每年的4月到10间月的每天上午10点到下午4点，但是它全年都可以伤害皮肤，尤其是在高海拔地区。而且被雪或冰反射之后，80%的UVB会被反射回来对皮肤进行二次伤害。 花青素 花青素是一类广泛存在于多种植物液泡中的水溶性天然色素，可以使植物呈现出多种不同颜色。花青素一般存在于红色、蓝色和紫色的水果、蔬菜、花朵及一些其他的组织器官中。花青素可以保护植物抵御一些逆境如低温、干旱和紫外线等的伤害；由于可以使植物呈现出多种颜色，因此帮助植物吸引昆虫传粉。在医药保健方面，花青素作为一种强自由基清除剂，可以预防心脑血管方面的疾病，且具有抗氧化、抗衰老、抗突变和抗癌等多种保健功能。 花青素生物合成途径 结构基因：ＰＡＬ，ＣＨＳ，ＣＨＩ，Ｆ３Ｈ，ＤＦＲ，ＡＮＳ、ＵＦ３ＧＴ 转录因子：Ｒ２Ｒ３ＭＹＢ、ｂＨＬＨ 和ＷＤ４０ 影响因素：光、温度、紫外线、营养状况、激素水平和一些其他的外界因素 光对花青素合成与积累的影响 一、光可以激活花青素代谢调控的酶促进花青素的合成 二、，光影响植物形态建成以及生长代谢，为花青素的合成提供必要的代谢底物 ＵＶ－Ａ和ＵＶ－Ｂ对花青素的影响是光对花青素调控的一个重要方面 材料 紫甘蓝品种为“早红”，青甘蓝品种为“中甘１１将甘蓝种子催芽后播种于３６孔穴盘中，每个穴盘播３粒种子，甘蓝生长至４周，待幼苗长出２～３片真叶，开始处理。ＵＶ－Ａ 和ＵＶ－Ｂ３０Ｗ 紫外灯管ＵＶ－Ａ（３２０～４００ｎｍ），ＵＶ－Ｂ（２８０～３２０ｎｍ）。 试验方法 幼苗生长至２～３片真叶（一般４周），开始进行紫外线处理。紫外线处理的强度为５ Ｗ／ｍ２（单位面积上的光功率）将甘蓝幼苗分为３组，分别为对照组，ＵＶ－Ａ处理组和ＵＶ－Ｂ处理组，每个处理设置３组重复。ＵＶ－Ａ和ＵＶ－Ｂ处理组，分别分６个时间段进行处理，即经过紫外线照射１，３，６，１２，１８和２４ｈ后，转移到黑暗中。最后保证从开始处理到黑暗结束处理时间为２４ｈ。即经紫外线处理的时间组合分别为１Ｌ＋２３Ｄ，３Ｌ＋２１Ｄ，６Ｌ＋１８Ｄ，１２Ｌ＋１２Ｄ，１８Ｌ＋６Ｄ，２４Ｌ＋０Ｄ。（Ｌ为紫外线照射，Ｄ为黑暗处理）。处理结束后取第一和第二片真叶作为样品，锡箔纸包好，立即放入液氮中冷冻并超低温冰箱保存（－８０℃），备用。 测定方法 花青素含量的测定：ｐＨ 差示法［２２］测定花青素的含量，并用ＳＰＳＳ软件进行数据处理。其测定方法为每份样品称量０．１ｇ，在研钵中加液氮研磨至粉末，转移到２ｍＬ的离心管中，每个样品分为２组，每个组设置３个重复，然后在２个组中分别加入２ｍＬ　ｐＨ＝１．０的缓冲液（５０ｍｍｏｌ／Ｌ　ＫＣＬ＋１５０ｍｍｏｌ／Ｌ　ＨＣＬ）和２ｍＬ　ｐＨ＝４．５的缓冲液（４００ｍｍｏｌ／Ｌ醋酸钠＋ ２４０ｍｍｏｌ／Ｌ　ＨＣＬ），将混合物于４℃条件下，１２　０００ｇ 离心１５ｍｉｎ，吸取上清液并稀释２倍后，测定其在５１０ｎｍ 处的ＯＤ值，并按照下面的公式进行花青素含量的计算。总花青素含量（ｍｇ／ｇ）＝ （Ａ５１０ＰＨ１．０－Ａ５１０ＰＨ４．５）×４８４．８／２４，８２５×稀释倍数其中常数４８４．８为花青素－３－葡萄糖苷氯化物的分子量，２４　８２５为其在５１０ｎｍ 处的摩尔吸光系数（ε）。计算出３次重复的花青素含量的平均值即为该样品总花青素含量 测定方法 基因表达分析：Ｑ－ＰＣＲ。根据ＧｅｎＢａｎｋ上甘蓝主要的结构基因ＰＡＬ、ＣＨＳ、ＣＨＩ、Ｆ３’Ｈ、ＤＦＲ、ＬＤＯＸ 和ＧＳＴ 的核酸编码区序列合成基因特异性引物；以甘蓝的看家基因β－ａｃｔｉｎ作为内参；转录因子部分，４种在拟南芥中