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产表面活性剂菌的筛选、发酵条件优化及定量研究

摘要 生物表面活性剂具有化学合成表面括性荆所无法比拟的环境兼容性及广阔 的发展前景,日益受到国内外科学界的关注。丰富生物表而活性荆产生菌资源、 提高其在发酵液中产量及对表面活性剂定量方法进行研究具有广泛的生物学利经 济意义。 本文通过设计筛选培养基,从饭店r水道污泥中筛选出12株生物表面活性 剂产生菌,它们都能使复筛发酵液的表卣张力从(68±0.2)mN/m降低到小于40 mN/m。经菌种鉴定,筛选出来的菌种中细菌占人多数,还有真菌,其中唐昌蒲 伯克霍尔德氏菌和犁头霉菌表面活性擐好,故采用正交试验对这两株菌种进行培 养条件优化。在最优培养条件下,唐昌蒲伯克霍尔德氏菌、犁头霉菌的生物表面 活性剂产量分别提高了17倍、13倍。通过亚甲基蓝测验和薄层色谱展开,唐昌 蒲伯克霍尔德氏蔚所产的生物表面活性剂是脂肽类生物表面活性剂,其CMC值 为20-25mg/1,。 在生物表面活性剂众多种类中,鼠李糖脂是研究最多的一种,所以,本文研 究了鼠李糖脂的蒽酮一硫酸法、L一半胱氨酸.硫酸法、苯酚.硫酸法及其影响因素, 结果显示,蒽酮.硫酸法优于其它两种方法,并得出了其最佳测试条件。发酵液中 剩余的葡萄糖、上清液对鼠李糖脂定量分析的影响可啦忽略,菌体和中层杂质对 鼠李糖脂的定量分析有一定程度的影响。因而,分析时要去除菌体。丽中层杂质 剥定量分析的影响可以通过制备含中层杂质的鼠李糖溶液标准曲线I『u消除。 很多吸附等温式表明溶液中表血活性剂浓度与表面/界面张力或吸附量有很 强的相关关系,但足,表面活性剂浓度与其表面张力和稀释倍数之间的关系研究 还未见有相关报道,所以本文对此展开研究,结果表明,由三阶段Hermit插值拟 合n+1个表面张力.稀释倍数离散数据点,并对该拟合曲线的前11个离散数据点所 在区间上进行积分,其积分值与浓度之间的线性回归方程F值的大小受积分区间、 表而活性剂种类、母液浓度与I临界胶束浓度的比值大小以及溶液中杂质的影响, 但F值均大于,i005。 关键词:生物表面活-I生剂;筛选;正交实验;培养条件优化;定量分析 耋塞垦重堡型鎏篓墅要誊:堡鬟篓墼:堡些墨塞塞丝圣 Abstraet withchemic巅stirfactant、biosurfactanthasobtainedinternational Compared attentionbecauseofitsenvironmentandbroad friendly applicationpotential. works of Therefore,theof bin-surfactant resources, exploitation microorganism their inlbrmentation ofsurfactant solution,and improvingyield studying quantifying haveextensive economic biologic赫andsignificance. Inthis strainswhichcould bin—surfactantwerescreened paper,twelve produce of aselectiveeuituralmediumandall themcouldreducethesurface bydesigning of solution to40mNtm.After tensionthefermentation

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