人工伴侣系统和尺寸排阻色谱耦合作用辅助变性溶菌酶复性.pdf

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摘要 本文研究了人工伴侣系统(Artificial chaperonesystem,ACS)即阳离子表面 性溶菌酶复性动力学行为,建立了相关的动力学模型。提出利用人工伴侣系统与 exclusion 尺寸排阻色谱(Size 用其对变性溶菌酶进行了复性。 (结果表明,模型计算值与实验数据能较好地吻合,并且在本实验条件下,复 性速率常数h随盐酸胍(GdmCl)浓度增加而降低,聚集体生成速率常数b则 发现,在适当GdmCl浓度下,增加人工伴侣的浓度可显著提高复性收率。文 另外,ACS与SEC耦合能有效辅助变性溶菌酶复性,其辅助复性作用远高 浓度、进样浓度和进样量等是影响耦合复性效果的重要因素√在问歇复性条件下, S-100HR凝胶体积为106mL)。 的复性收率(色谱柱内Sephacryl 在上述研究基础上,丌发出ACS与SEC耦合连续复性方法,并利用其对浓 S一200 HR,则可使Img·mL。的 内填装凝胶同上)。如将凝胶介质变为Sephacryl 变性溶菌酶获得89%的复性收率。、) 关键词:溶菌酶i 复发人工伴4弦尺寸排阻色谱i表面活性剂, 环糊精 Abstract work This wasconcernedwith renaturationassistedthe protein by artificial chaperone ammonium system(ACS),i.e.,cetyltrimethylbromide(CTAB)and kineticmodel (p—CD).A was to therenaturationof employedexpress process denatured novel renaturation methodsize lysozyme.A using exclusionchromato— ACSwas graphy(SEC)assistedby explored. Thekinetic wasin model with good the results.With agreement experimental increasing renaturationrate guanidine constants there existeda GdmClconcentrationthatminimized decreased,but specific the rate tOmaximum oftherelative constants,thus aggregation leading

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