光谱法研究三种有潜在致癌性的农药与dna相互作用机理.pdf

摘要 摘 要 近年来，农药致癌的发生率正呈现逐年上升的趋势，DNA作为致癌物质的 主要作用靶点，成为研究农药致癌性机理的焦点。本论文应用荧光光谱、紫外 可见光谱、红外光谱、圆二色谱、核磁共振和原子力显微镜技术结合流体力学 方法，从不同角度对几种美国环境保护署(EPA)报道具有潜在致癌性的农药(氰草 的研究，旨在阐明致癌性农药对DNA的损伤机制，为从分子水平上理解农药的 致癌机理，防止农药毒害，开发新型高效低毒农药提供理论依据。本文主要分 为四部分： 1．综述了近年来农药致癌的现状、致癌方式、研究手段以及农药与小牛胸 腺DNA(ctDNA)相互作用的研究现状、研究方法和化学计量学的应用； 2．在生理酸度(pH 7．4)条件下，通过紫外可见光谱(UV-vis)、荧光、圆二色 谱(CD)和傅里叶红外光谱(FT-IR)等多种光谱方法并结合粘度实验，研究了氰草 津与ctDNA相互作用。结果表明，氰草津能以嵌插方式作用于ctDNA的G_C least 碱基对。另外，应用交替最小二乘法(alternatesquares，ALS)解析了氰草津与 组分(氰草津，EB和ctDNA-氰草津复合物)的浓度变化信息及其相应的光谱曲 线，表明氰草津可以通过嵌插方式与EB竞争结合ctDNA。 7．4Tris-HCl缓冲溶液的水解 3．利用I，V__Vis吸收光谱评估了灭菌丹在pH 过程，以及加入ctDNA后对水解过程的影响。ALS算法解析灭菌丹水解过程的 光谱数据，发现灭菌丹的水解过程中存在四个组分(灭菌丹、邻苯二甲酰亚胺、 邻苯二甲酸以及一种未知的不稳定的中间产物)，并获得了这些组分的浓度变化 趋势及其相应的光谱图。DNA结合试验结果显示灭菌丹或中间产物可以嵌插进 DNA双螺旋中，邻苯二甲酸则以非经典嵌插方式与DNA结合而邻苯二甲酰亚 胺则不能与DNA结合。 4．在生理酸度环境下(pH7．4)，联合运用紫外可见光谱，荧光光谱，CD，FT_IR， 核磁共振氢谱(1HNMR)，结合粘度试验，原子力显微镜(AFM)和分子模拟技术 对NOL与etDNA相互作用进行了全面的研究，结果显示三唑醇以嵌插方式与 摘要 DNA结合，并造成DNA双链部分断裂损伤，三唑醇与GC碱基之间由于两个氢 键的形成而具有特异性结合。另外，对Ca2+、M92+存在下三唑醇与DNA的相互 作用进行了研究，结果发现两种金属离子均能加强三唑醇与ctDNA的相互作用， 随着体系中两种金属离子浓度的增加，ctDNA一三唑醇复合物的结合常数都呈现 出先增大后减小的趋势。由此得出，Ca2+和M92+对该ctDNA一三唑醇结合的影 响分别取决于金属离子DNA的碱基和磷酸基团间的结合程度。 关键词：致癌农药；DNA；氰草津；灭菌丹；三唑醇；相互作用；化学计量学 II ABSTRACT ofthe shows锄 Inrecent incidencecancer-causingpesticides years，the tocus is the isthemain of becoming which carcinogens trend．DNA target increasing thisthesis，fluorescence