茶粕多糖提纯工、结构初探及体外抗氧化研究.pdf

摘要 摘要 茶籽经榨油后的饼粕中含有茶皂素、蛋白质、淀粉和糖类等物质。目前有 关茶粕成分的研究主要集中在茶皂素，而对茶籽多糖的研究相对甚少，茶籽多 糖作为一种重要的茶源提取物和活性多糖，具有一定的研究和应用价值。因此， 本文在对茶粕主要营养成分分析的基础上，对茶粕多糖的提取、纯化工艺，结 构鉴定以及体外抗氧化效果进行研究。主要结果如下： 1．原料湿茶粕主要营养组成及含量分别为：水分为59．09％，灰分为O．74％， 粗脂肪为6．80％，粗蛋白为7．61％，粗纤维为2．90％，总糖为9．84％。 2．采用超声波辅助提取茶粕多糖，经单因素实验及正交实验优化得到的茶 粕多糖最优提取工艺为：料液比1：15，超声功率150W，提取温度80℃，提取时 间45min。在此优化工艺条件下，茶粕多糖得率约为14．22土0．51％。 3．通过比较Sevage法、三氯乙酸法和木瓜蛋白酶．Sevage法，确定木瓜蛋 白酶．Sevage法的脱蛋白效果最佳，对该法进行单因素实验≠]响应面优化，得到 茶粕多糖的最佳脱蛋白工艺：酶用量78U／mL，酶解温度65℃，pH7．0，酶解时 间92min，然后再结合3次Sevage法。在此最佳工艺条件下，得到的平均蛋白 脱除率为80．52％，多糖保留率为84．29％。 A．25对脱蛋白后的茶粕多糖进行分级纯化，得到 4．采用DEAE．Sephadex S．200凝胶色谱法和HPLC法鉴定其纯度，结果表明 酸性多糖；采用Sephacryl 的单糖组成为葡萄糖、甘露糖和半乳糖，摩尔比为3．13：1．00：0．03。TSP3的单糖 组成为葡萄糖、甘露糖、半乳糖、 阿拉伯糖、半乳糖醛酸和少量鼠李糖，摩 尔比为0．42：1．00：1．09：0．96：0．43：0．19。 红外光谱测定显示TSPl、TSP2和TSP3均具备多糖的特征吸收峰，且以0t 构型的吡喃糖为主。1H NMR表明，TSP3的组成单糖为q和D构型，其中阿拉 伯糖，鼠李糖和半乳糖醛酸残基为q构型，半乳糖残基为B构型；13CNMR结 果表明TSP3由六种单糖组成，并且含有糖醛酸，与HPLC鉴定结果一致。 6．体外抗氧化实验表明，茶粕多糖清除·OH及DPPH·的能力与浓度呈 lI 摘要 J下相关，当茶粕多糖浓度为5mg／mL时，对·OH及DPPH·的清除率分别达到 84．6％和73．5％；但对超氧阴离子的清除能力较弱，并且几乎没有还原能力。 关键词：茶粕多糖；提取：脱蛋白；分级纯化；结构鉴定；体外抗氧化 Abstract 一————————————————————————————————————————一 ABSTRACT alotoftea and cakecontains seed saponin，protein，starch CamPlli口oleifera cakeare aboutCamellia seed oftheresearches oleifera sacch撕des．However,most andactive onlea an teaextract focus important saponiam