地衣芽孢杆菌T-01胞外多糖生产和功能的研究.pdfVIP

摘要 地衣芽孢杆菌是一种益生菌，可用于人和动物肠胃紊乱的治疗和预防，但其作用机理并不 清晰。本论文主要从其发酵液中的多糖着手，研究地衣芽孢杆菌胞外多糖发酵条件、多糖中杂 蛋白的去除、多糖的功能，初步探讨其作用机制。 实验发现，在本试验设计中，当发酵培养基中玉米粉4％、豆饼粉2％、玉米浆0．3％、 CaCl20．05％，K2HP040．2％，初始pH为7．种子液菌龄为16小时，接种量为5％时，发酵液中 活菌数和多糖产量都达到最高水平。另外，通过适当控制摇床转速、装液量等以维持适当的溶 氧水平的因素，也会影响多糖产量。多糖产量还跟地衣芽孢杆菌本身所分泌的a，淀粉酶、蛋白 酶有一定关系。当发酵液中乙醇浓度为50％、70％时，分别得到两种水溶性很好的多糖。 用Scrag法去除多糖中杂蛋白时，样品与氯仿．正丁醇体积比为4：1，时间为30分钟比较 适宜，既能提高多糖得率，又能尽量除去蛋白质。如用酶法脱除蛋白，宜用胰蛋白酶，用量为 2．0U／rag，时间为4小时。相比之下，酶法稍好于Scvag法，但酶法操作较复杂，时间稍长。 x 当DPPH溶液浓度为510。5mol／L时，两种多糖溶液对DPPH的Ic∞(抑制率为50％时多 糖的浓度)均为3．2×1049／mL，表明所提两种多糖有较强的清除自由基的效果。发酵上清液中 所添加多糖剂量为5mg／mL时，能显著增加发酵液中SOD酶活(P‘0．01)。表明多糖具有较强 的抗氧化能力。 用MTT法进行了T、B淋转实验，结果表明两种多糖在一定浓度时，能增强T、B淋巴细 胞转化作用，间接表明两种多糖能提高机体的免疫能力。 对致病菌的作用研究表明，两种多糖本身不具备杀菌能力，而是致病菌对多糖的利用率低 才导致自身繁殖速度降低。 关键词：地衣芽孢杆菌，多糖，生产，功能 ABSTRACT Bacillus TS—olis knownas for and of licheniformis probiotic．usedtherapyprophylaxis notclear．Inthis themechanismhasbeen disordersinboth andanimals．but gastrointestinal humans studiedthe methodof on fermentationandextration removal，function paper,I conditions，theprotein themechanism． exocelluar triedtodiscover pulysaccharide，while corn meal that contains Theresultsindicatedthe fermentationreedium powder optimal 4％：soybcan culturetime 7；seed 16h； 0．05％；KzHPO,0，2％I；nitial 2％；com O．3％；CaCl2