橙色红曲菌（A3.4384）SOD基因的克隆与功能分析.pdfVIP

捕 蔓 摘 要 红曲菌是我国重要的微生物资源，能够产生多种具有生物活性的代谢产物， 具有很高的商业价值。但是由于红曲菌产桔霉素问题的存在，对红曲的安全性 提出了怀疑。实验室前期研究克隆得到了八条可能与桔霉素产毒相关的EST序 列。经生物信息学分析，发现其中一个基因，5编码的蛋白与Mn-SOD高度同 源。 dismutase，SOD)是一类广泛存在于生物体 超氧化物歧化酶(唧xide 内的金属酶，能够催化超氧阴离子发生歧化反应，具有抗衰老，抗辐射、抗炎 等多种生物活性．目前已广泛的应用于医药、食品、化妆品等领域。本研究利 用分子生物学技术和方法，初步研究了该基因的功能，主要研究内容如下： I将其完全酶切后亚克隆 含有SOD基因的克隆子Q5】巳4，利用限制性内切酶Sal 至pUCl8质粒SalI位点。筛选到含有S∞基因及侧翼序列的克隆子 游356bp序列。 列长度约为1．8kb． 3．将该基因编码框序列插入毕赤酵母分泌表达载体pPIC9K，构建重组表 行摇瓶