具有ph依赖性普鲁士蓝纳米颗粒类双酶活性研究.pdfVIP

摘要 摘 要 【题名】具有pH依赖性的普鲁士蓝纳米颗粒类双酶活性研究 目前生物酶已经广泛商品化，在临床诊断、生物分析等领域都有熏要的应用，但山 于生物酶一般都具有成本高，保存条件苛刻，容易失活等缺点，应用纳米技术了l：发稳定 便宜的模拟酶逐渐成为了近年来纳米研究领域中的一个热点。虽然目前已经有较多的纳 直是该领域的一个瓶颈问题。本论文基于_Ij{『期实验研究，合成了一种稳定性和分散性良 好、形貌均一的普鲁士蓝纳米颗粒，研究了其具有pH和温度依赖性的类双酶催化活性， 还发现其不仅在酸性条件下具有高效的类过氧化物酶活性，而且在中性条件下具有类过 氧化氧酶特性。利用电子自旋谐振(ESR)、吸收光谱、溶解氧测最等实验，分别对PBNPs 的类过氧化物酶活性和类过氧化氢酶活性的催化机制进行了解释。基于这些特性还应用 其进行了灵敏的双氧水检测和初步的超卢与磁共振双模态造影的体外实验研究。 首先，利用液相沉淀法在以聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作为稳定剂的水相中，以 blue K4[Fe(CN)6】和FeCl3为反应原料合成了普鲁士蓝纳米颗粒(Prussian nanoparticles， PBNPs)。通过定量的调节反应过程中反应物原料的滴加速率以及滴定结束后反应冷却 温度的控制，实现了对普鲁士蓝纳米颗粒尺寸和形貌的调控。 其次，选取了两种表面分别带正负电荷并且具有特定显色功能的色原底物：3，3t，5，5，一 性，利用芬顿反应以及与氰基(-CN．)相结合能提高Fe”和Fe2十芬顿反应的效率，初步 阐述了KFeⅢ【Fe“(CN)6】催化活性高于KFe“[Fe川(CN)6】的机制。 O～ 再次，在对PBNPs的过氧化物酶活性的温度(T)依赖性检测过程中，发现在1 60。C范围内其催化活性随温度的增长呈正相关，从70。C．刀：始呈现出下降趋势。对其过氧 化物酶活性的pI 酶活性而在中性或弱碱性条件下该催化活性几乎丧失，同时却有许多气泡产生。在室温 和pH3．6的条件下，对PBNPs进行了酶促反应动力学米氏常数的检测实验，发现其K。砒 值比辣根过氧化酶(HRP)和Fe304NPs要高1~2个数．景级。通过溶解氧电极，可以明 速上升，而相同条件下未加PBNPs的H202溶液，其氧溶解度和氧饱和度几乎不变。该 现象说明产生的气泡为氧气泡，同时也有力的论证了在中性或弱碱性条件下PBNPs可 赖性而．KJL乎呈指数增长。利用自旋捕获ESR技术分别研究了酸性和中一陛条件下PBNPs 摘要 的催化机制，分别对PBNPs类过氧化氢酶和类过氧化物酶的催化活性进行了讨论。 最后，基于PBNPs在不同pH条件下的类双酶活性(在酸性条件下表现出高效的过 氧化物酶活性；在中性条件下表现为过氧化氢酶活性)，对其进行了两项初步的应用研 究：一项是利用其高效的类过氧化物酶活性将其应用于低浓度H202检测，并获得了较 低的浓度检测下限_2．34x10‘1M；另一项是利用其固有的超顺磁性和作为类过氧化氢酶 催化双氧水产生的氧气泡，将其用作核磁共振与超声成像的双模态造影。 [关键词]普鲁士蓝纳米颗粒，模拟酶，过氧化物酶，过氧化氢酶，自由基，电子自 旋共振，检测 Abstract onPrussianblue with 【Topic】nestudy nanoparticlespH—dependent activities are have in Biologicalenzymeswidelycommercialized，which im