利用SSR分子记选育低氰含量高丹草新品系的研究.pdfVIP

摘 要 为培育氢氰酸含量低、综合农艺性状优良的高丹草新品种，本研究将 Z3A、V4A 等高粱雄不育系与黑壳、白壳、棕壳、红壳 4 种苏丹草组配进行人工授粉杂交，获得 了种间杂种 F1 代。从 F2 代分离群体中选出低氢氰酸含量和高氢氰酸含量的植株建立 基因池，筛选出与低氢氰酸含量相关的 SSR 特征片段，对其进行克隆与序列分析， 将 SSR 标记与系谱法相结合进行了高丹草低氢氰酸含量优良新品系的选育研究。主 要结果如下： 1．高粱雄不育系 Z3A、V4A 与 4 种苏丹草杂种 F1 植株高大，生长势强，超亲优 势 13.86%～39.42% ；穗型均呈双亲中间型，分蘖能力强，育性高，PMC M Ⅰ染色体 配对行为规则；鲜草茎叶氢氰酸含量为 9.38 ～42.01mg/kg ，花期主茎糖锤度值为 8.89%～9.46% 。 2.试验获得与低氢氰酸含量相关的 SSR 特征片段 TZ1、TZ2 和 TZ3，其序列全 长分别为 281bp 、220bp 和 650bp，可用于高丹草低氢氰酸含量株系选择。经同源性 比对发现，片段 TZ1 与高粱生物活性炭 88M4 克隆全序列同源性为 95%，与香附子 Cyr_350 SSR 标记的基因组序列同源性为90% ；片段 TZ2 与高粱推测受体蛋白激酶基 因组序列同源性为75%，与水稻微卫星 MRG2713 基因序列同源性为88%；片段 TZ3 与高粱假想蛋白基因序列同源性为 96% 。开放阅读框分析表明，片段 TZ1 含有 1 个 126bp 的假定开放阅读框，可编码 41 个氨基酸；片段 TZ3 含有 1 个 294bp 的假定开 放阅读框，可编码 97 个氨基酸；TZ2 中没有完整的开放阅读框。 3 ．选育出的高丹草新品系 SLCN01、SLCN02 和 SLCN08，株高 387.6～414.8cm， 生育期 127～138d ，单株分蘖数 6.16～6.92 个，鲜草茎叶氢氰酸含量低至 6.12～ 7.06mg/kg ， 鲜 草 产 量 139935.03 ～ 151345.33kg/hm2 ， 种 子 产 量 5662.80 ～ 2 5838.75kg/hm ，拔节期粗蛋白质含量 14.45%～15.68%，粗纤维含量低至 24.50%左右， 开花期主茎糖锤度值 10.88%～12.01%，赖氨酸含量 0.422%～0.468%，新品系育性高， 染色体遗传稳定。 4 ．用 9 对 SSR 适宜引物扩增 11 个高丹草材料基因组 DNA，得到 332 个 SSR 位 点，多态性位点比率高达 95.78% 。每对引物扩增的 SSR 指纹图谱差异明显，可用于 11 个高丹草新品系 （种）的分子鉴定。以GD 值 0.61 为基准，将 11 份高丹草材料划 分为 3 类：SLCN01、SLCN02、SLCN03、SLCN09、SLCN10、蒙农 3 号为一类，SLCN04、 SLCN05、SLCN06、SLCN08 为另一类，SLCN07 单独为一类。 关键词：高粱雄性不育系；苏丹草；种间杂种；低氢氰酸含量；SSR 特征片段；序列 分析；高丹草新品系选育 Breeding of New Strains of Sorghum-Sudangrass of Super-low Content of HCN by SSR Molecular Markers Abstract In order to breed new strains of Sorghum-Sudangrass of good agronomic traits and super-low hydrocyanic acid content, four interspecific hybrids F1 were obtained via crossing between male sterile line of Sorghum and black shell Sudangrass, white shell Sudangrass, brown shell Sudangrass, red shel