利用cry1a和cpti双价基因及组织特异启动子增强转基因水稻对螟虫的抗性.pdfVIP

摘 要 自1987年首次报道转基因抗虫作物以来，已有40多种不同类型的抗虫基因用于 各类作物遗传转化，转基因抗虫玉米和棉花等已经实现产业化，并产生了明显的经济 效益。近年来，转基因抗虫作物的抗虫持久性和生物安全性日益受到育种工作者的重 视，并成为抗虫转基因研究的热点之一。本研究优化了农杆菌介导法水稻转基因体系， 启动子，进行了水稻高效安全性抗虫转基因研究，并分析了抗虫基因在转基因水稻中 f 的遗传特性，；I主要结果如下： 。、 1．确立了优化的农杆菌介导法水稻高效转基因体系，供试的粳稻品种(系)“浙 大19”、“秀水11”和“秀水63”的转化率都达到80％以上。 余块盾片来源愈伤组织与农杆菌共培养后，得到约1300块潮霉素抗性愈伤，从中分 对9个T1代转基因株系进行的室内和田间抗虫鉴定表明，3个株系对二化螟具有很高 的抗性，初孵幼虫的死亡率都达100％，白穗率都在4％以下。 律进行了分析，结果表明：6个株系中阳性植株与阴性植株之比符合3：l；2个株系显 贝插入基因组中，因而符合外源基因非连锁双拷贝整合后的孟德尔遗传规律；另一个 株系中CrylA(c)基因阳性植株与阴性植株之比为3：2，通过正反交试验表明，其中 CrylA(c)基因在Tl代株系产生的偏分离现象可能与该株系中抗虫基因通过花粉的传 递能力下降有关。 4．以水稻品种“明恢63”的基因组DNA为模板，用PCR方法克隆出水稻蔗糖 合酶基因起始密码子以前(包括第一内含子)的上游序列RSPl及其不包括第一内含 载体为对照，将上述三种载体用于农杆菌介导法水稻品种“秀水1l”和“秀水63” 的遗传转化。 ． 5．对转基因水稻植株各部位的GUS组织化学分析表明：两个转基因品种中RSPl 和RSP2都可以驱动Gus基因在根、茎、叶组织中高效特异表达，但在胚和胚乳中不 + 表达。作者认为，水稻蔗糖合酶基因启动子应用于水稻转基因育种具有较高的食品安 并用于农打菌介导法水稻品种“秀水11”和“秀水63”的遗传转化，获得大量转丛 因水稻植株。y ， 关键词： 7R石舀删辩删；农荐吾口$∞础姻轨。埘。妇删：L。y1A(趴 CpTI：水稻蔗糖合酶基因启动子；组织特异表达：生物安全性 √／k／’＼’／ Abstract of transformation Withthe of crop technologies plantbio-technology,the development insectresistance， has thefirst of tobaccofor been transgenic report greatlydeveloped．Since usedin been mechanismshave insect—resistant ● over40insecticidalwithdifferent